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儀器網(wǎng)/ 應(yīng)用方案/ 埃博拉病毒VP40影響細(xì)胞循環(huán)和細(xì)胞外囊泡的生物發(fā)生過程

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背景:埃博拉病毒(EBOV)主要攻擊骨 髓細(xì)胞,其致命感染會引起大量的T細(xì)胞死亡。研究已證明,受感染細(xì)胞所產(chǎn)生的外泌體中包含的埃博拉病毒蛋白VP40導(dǎo)致了受體免疫細(xì)胞的死亡。


方法:通過克隆技術(shù)表達(dá)VP40,研究者分析了供體細(xì)胞循環(huán)、細(xì)胞外囊泡的生物發(fā)生過程和受體免疫細(xì)胞的死亡。通過激酶和染色質(zhì)免疫沉淀實驗,研究者研究了細(xì)胞周期蛋白D1的轉(zhuǎn)錄和VP40的核定位。通過質(zhì)譜、細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)免疫印跡實驗,研究者檢測了細(xì)胞外囊泡的內(nèi)含物。野生型埃博拉病毒感染實驗在生物安全等級為4級的實驗室平臺進(jìn)行。

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EVs size and concentration by Zetaview


結(jié)果:含有VP40的細(xì)胞外囊泡誘導(dǎo)了受體T細(xì)胞和單核細(xì)胞的凋亡。細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)水平上調(diào),導(dǎo)致了表達(dá)VP40的克隆加速生長,而核內(nèi)的VP40蛋白會結(jié)合到細(xì)胞周期蛋白D1的啟動子上。細(xì)胞循環(huán)被加快,會影響細(xì)胞外囊泡的生物發(fā)生過程,Z終產(chǎn)生了數(shù)量較少、但粒徑更大的細(xì)胞外囊泡。含有VP40的細(xì)胞外囊泡的內(nèi)含物富含能結(jié)合核糖核酸的蛋白和細(xì)胞因子(白細(xì)胞介素-15、轉(zhuǎn)化生長因子-β1和干擾素-γ)。Z終,受埃博拉病毒感染的細(xì)胞及其細(xì)胞外囊泡中包含了VP40、核蛋白質(zhì)和糖蛋白。


結(jié)論:細(xì)胞核內(nèi)的VP40上調(diào)了細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)水平,導(dǎo)致異常的細(xì)胞周期和異常的細(xì)胞外囊泡生物發(fā)生過程。被埃博拉病毒感染的細(xì)胞所產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡中包含的細(xì)胞因子和埃博拉病毒蛋白引起了免疫細(xì)胞的大量死亡。


Michelle L. Pleet, et al. Ebola Virus VP40 Modulates Cell Cycle and Biogenesis of Extracellular Vesicles, The Journal of Infectious Disease, 2018:218 (Suppl 5) ? S365


來自德國Particle Metrix ZetaView所具備的單一顆粒跟蹤技術(shù),結(jié)合經(jīng)典微電泳技術(shù)和布朗運動成為現(xiàn)代的分析手段。


主要應(yīng)用于外泌體,細(xì)胞囊泡,脂質(zhì)體,蛋白質(zhì)聚集,病毒樣品,納米氣泡等研究領(lǐng)域。

樣品濃度范圍:105-109粒子/ml(粒度)

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大昌華嘉科學(xué)儀器部一直關(guān)注新型冠狀病毒疫情,積極探索相關(guān)研究報告,**時間發(fā)給大家參考。


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