【概述】

近些年國抽細(xì)則中新增不少項(xiàng)目檢測(cè)方法。比如半固體調(diào)料中羅丹明B指定的測(cè)試方法為《BJS 201905 食品中羅丹明B的測(cè)定》；豆芽中4-氯苯氧乙酸鈉和6-芐基腺嘌呤指定的測(cè)試方法為《BJS 201703 豆芽中植物生長調(diào)節(jié)劑的測(cè)定》；雞肉中金剛烷胺新增方法《GB 31660.5-2019 動(dòng)物性食品中金剛烷胺殘留量的測(cè)定》；多種農(nóng)殘新增檢測(cè)方法《GB 23200.113-2018 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定》等等，針對(duì)這些新增方法，中檢維康將會(huì)逐個(gè)推出應(yīng)用方案。

   本次分享的方案是BJS 201703 豆芽中植物生長調(diào)節(jié)劑的測(cè)定，該方法使用QuEChERS方法進(jìn)行提取和凈化，可同時(shí)檢測(cè)豆芽中的11種植物生長調(diào)節(jié)劑，QuEChERS方法操作簡(jiǎn)便，回收率佳，中檢維康對(duì)赤霉素，6-芐基腺嘌呤，4-氯苯氧乙酸，2,4-二氯苯氧乙酸進(jìn)行了驗(yàn)證，加25μg/kg, 回收率75%-95%。

豆芽中4種植物生長素的UPLC/MS/MS測(cè)定（QuEChERS）

《BJS 201703 豆芽中植物生長激素的測(cè)定》
一、樣品提取
準(zhǔn)確稱取 10.0 g 經(jīng)粉碎的豆芽置于50 mL離心管中，加入20 mL 含 1% 甲酸乙腈溶液，2500 rpm 渦旋混勻 5 min；然后加入 QuEChERS 萃取鹽包(貨號(hào)：Q050025 )，立即手動(dòng)振搖 30s，渦旋 2min；再以 5000r/min 離心5min，使乙腈和水分層，上層乙腈層待凈化。
二、樣品凈化
精密量取上層乙腈層5 mL置于 QuEChERS凈化管(貨號(hào)：Q015014 )15 mL凈化管中，2500 rpm 渦旋混勻 2min，以 5000 r/min 離心5 min，移取上層清液4 mL于另一 15 mL 離心管中，45℃水浴氮吹至干，用甲醇定容至 1mL，過 0.22 μm 尼龍濾膜供上機(jī)測(cè)試。
三、標(biāo)曲配制
稱取空白豆芽樣品 10.0 g 按照上述一、二步驟操作，作為空白基質(zhì)提取液；分別精密量取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)液加入到空白基質(zhì)提取液中，用甲醇定容至 1 mL，配制成適當(dāng)濃度的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
四、儀器條件
色譜條件
儀器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura）
色譜柱：OSD色譜柱 (2.1 mm×50 mm, 1.8 μm)
流動(dòng)相：A：5 mmol/L 乙酸銨
        B：甲醇（0.1% 甲酸）
洗脫方式：梯度洗脫，見表 1
表 1 梯度洗脫程序

流速：0.3 mL/min 柱溫：35℃ 進(jìn)樣量：5 μL
質(zhì)譜條件
離子源：HESI 電噴霧電壓：3500 V
鞘氣壓力：35 arb 輔氣壓力：3 arb
離子傳輸管：380℃ 輔氣溫度：420℃

表 2 組分名稱、保留時(shí)間及特征離子一覽表（* 為定量離子）

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表 3 豆芽中 4 種植物生長激素加標(biāo)回收結(jié)果（25.0 μg/kg）

豆芽中植物生長激素檢測(cè)色譜圖如下：

從上至下出峰順序依次為：4- 氯苯氧乙酸、2,4- 二氯苯氧乙酸、6- 芐基腺嘌呤、赤霉素。

注意事項(xiàng)：
1. 該實(shí)驗(yàn)采用 UPLC/MS/MS 檢測(cè)，對(duì)部分目標(biāo)物有基質(zhì)抑制效應(yīng)，如 6- 芐基腺嘌呤，建議配制基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行定量，校正回收率。
2. 在標(biāo)準(zhǔn)《BJS 201703》中，只取 4 mL 提取液進(jìn)行凈化，離心后取全部凈化液氮吹復(fù)溶，但在實(shí)際操作中，離心后實(shí)際氮吹復(fù)溶的凈化液體積不到 4 mL，會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果偏低，建議取 5 mL 提取液凈化，再精密量取 4 mL 凈化液氮吹復(fù)溶

【儀器/耗材清單】