一、樣品提取 

準確稱取牛奶 1.0 g 于 15 mL 離心管中，加入 3 mL 水，加入 400 μL 0.25 mol/L 亞鐵氰 化鉀及 400 μL 1.0 mol/L 乙酸鋅溶 液，超聲混勻 5 min；4000 r/min 離心 5 min，取上清液。離 心管中繼續(xù)加入 2 mL 水，重復提取一次，合并上清液備用。 

二、SPE 柱凈化（Copure? ACE，500 mg/6 mL） 

活化：固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上樣和洗脫：往固相萃取柱中加入合并上清液，收集流出液； 再加入 4 mL 水洗脫，收集合并洗脫液（整個上樣和洗脫過程 流速控制在 1 mL/min 內）。 上機分析：洗脫液用水定容至 10 mL，搖勻，取 1 mL 過 0.22  μm 濾膜，供 HPLC 測試。 

三、儀器條件 

設 備：Waters Alliance 2695 色譜柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm) 檢測波長：214 nm 檢測器：Waters 2487 紫外檢測器 流動相：A：20 mmol/L 硫酸銨溶液 B：乙腈 洗脫方式：等度洗脫，A：B=75：25  流速：1.0 mL/min 進樣體積：20 μL 

四、實驗結果 

表 1 20.0 mg/kg 牛奶中安賽蜜的添加回收結果