1、提取

5 g 粉碎樣品與25 mL 甲醇混合，振蕩提取5 min，于6000 rpm 下離心5 min，收集上清液。

25mL 甲醇重復提取一次，合并上清液，用甲醇定容至50 mL，待凈化。

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2、凈化

a 活化： 依次將5 mL 甲醇、5 mL 水加入ProElut PXC 150 mg/6 mL (Cat.#68204)，流出液棄去；

b 上樣： 將20 mL 提取液（相當于2 g 樣品）加入柱中，流出液棄去；

c 淋洗： 依次用5 mL 2% 乙酸水溶液、5 mL 甲醇淋洗，淋洗液棄去；

d 洗脫： 5 mL 5% 氨水甲醇溶液洗脫，收集洗脫液；

e 重新溶解：在40 oC 下氮氣吹干洗脫液，1 mL 流動相溶解殘渣，微孔濾膜過濾后，HPLC 分析

色譜柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流動相：甲醇/ 0.05 mol/L 磷酸溶液= 75/25

流速：1.0 mL/min

進樣量：20 μL

柱溫：室溫

檢測器：UV 230 nm

適用于配合飼料、預混飼料和濃縮飼料中氯米芬的檢測。

1. 反式氯米芬；2. 順式氯米芬