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蘇木精-伊紅染色使用說明
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2018-11-26 10:00 4020閱讀次數(shù)
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蘇木精-伊紅染色使用說明【試劑配制】蘇木精染液蘇木精配方很多,現(xiàn)介紹常用的是Harris蘇木精染液。蘇木精1g95%乙醇溶液10ml鉀礬或銨礬20g蒸餾水200ml0.5g冰醋酸8.0ml先將蘇木精溶于乙醇溶液。鉀礬加溫溶解燒瓶后,將倒入,繼續(xù)加熱1min。加熱停止后,緩慢加入0.5g,再繼續(xù)加熱煮沸1min。迅速將燒瓶移人冰水內(nèi)。染液冷卻呈深色時,加冰醋酸過濾后即可使用。棕色磨口瓶保存。室溫保存2個月,4℃保存4個月左右。1.0%伊紅染液將1.0g水溶性伊紅溶100ml蒸餾水中,每100ml伊紅液中加0.2ml冰醋酸。【實驗步驟】(1)石蠟片經(jīng)脫蠟、水化,單層細胞片經(jīng)漂洗固定。(2)蘇木素染液染5~10min(染色時間與溫度、染液成熟度有關)。(3)自來水換數(shù)次,標本轉(zhuǎn)為深藍色。(4)分色:浸入1%稀鹽酸乙醇液(100ml75%乙醇溶液中加1d鹽酸)分色數(shù)秒鐘至1min,脫去多余的藍浮色,標本轉(zhuǎn)為淡紫紅色鏡下呈紫紅色,胞質(zhì)無色或灰藍色(后者為幼稚細胞)。(5)藍化:自來水浸洗10min或數(shù)小時,甚至更長,標本從淡紫紅色轉(zhuǎn)為鮮艷的淺藍色。注意:為縮短自來水浸洗時間,使蘇木素更加顯色,可將標本置淡氨水溶液(400ml自來水加氨水2滴)中10min,切片很快呈鮮艷的淺藍色,經(jīng)此處理的標本,要經(jīng)自來水充分浸洗,否則會影響伊紅染色。(6)蒸餾水漂洗。(7)伊紅染液5~10min,進行對比染色。(8)用蒸餾水洗去玻片的浮色,經(jīng)70%、80%、90%梯度乙醇溶液脫水各一次,再分別經(jīng)95%、100%乙醇溶液脫水各兩次,每次1min。(9)浸入二甲苯兩次,每次1min。中性樹膠封片【注意事項】(1)Harris蘇木精染液即配即用,不能久存,宜少量配用。(2)HE染色時,除大批標本采取浸染外,一般以滴染為好。染液反復使用而被水稀釋,使特異性染色和染色速度下降。(3)蘇木精染液出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,是染液變質(zhì)的一種指示,但濾液仍可使用一段時間。蘇木精染液效力判斷方法為:將蘇木精染液滴人自來水中,若染液出現(xiàn)由紫紅色變?yōu)樗{色的現(xiàn)象,即證實染液有效。(4)蘇木精染色后,鹽酸乙醇溶液分色是關鍵步驟:以細胞核染色清晰、細胞質(zhì)基本無色為佳。核過染,延長分色時間;染色太淺,則應重新染色。(5)伊紅染色后,低濃度乙醇溶液脫水后極易脫色:為防止此現(xiàn)象的發(fā)生,標本脫水至95%乙醇溶液后,再轉(zhuǎn)入95%乙醇溶液配制的1%伊紅液中復染3~5min分鐘,然后繼續(xù)脫水透明,可獲得滿意效果。(6)無水酒精脫水后,轉(zhuǎn)入二甲苯中出現(xiàn)混濁現(xiàn)象,為脫水不徹底的表現(xiàn)。此時應退回乙醇溶液或更換100%乙醇重新脫水。(7)封片時,蓋玻片要大于切片。切片裸露,標本很快褪色。(8)市售95%乙醇溶液常含雜質(zhì),只能用于脫水或清潔玻片。(9)二甲苯是一種易揮發(fā)的有毒液體,實驗者要帶眼罩、口罩、手套,在通風的地方操作。
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蘇木精-伊紅染色使用說明
- 蘇木精-伊紅染色使用說明【試劑配制】蘇木精染液蘇木精配方很多,現(xiàn)介紹常用的是Harris蘇木精染液。蘇木精1g95%乙醇溶液10ml鉀礬或銨礬20g蒸餾水200ml0.5g冰醋酸8.0ml先將蘇木精溶于乙醇溶液。鉀礬加溫溶解燒瓶后,將倒入,繼續(xù)加熱1min。加熱停止后,緩慢加入0.5g,再繼續(xù)加熱煮沸1min。迅速將燒瓶移人冰水內(nèi)。染液冷卻呈深色時,加冰醋酸過濾后即可使用。棕色磨口瓶保存。室溫保存2個月,4℃保存4個月左右。1.0%伊紅染液將1.0g水溶性伊紅溶100ml蒸餾水中,每100ml伊紅液中加0.2ml冰醋酸?!緦嶒灢襟E】(1)石蠟片經(jīng)脫蠟、水化,單層細胞片經(jīng)漂洗固定。(2)蘇木素染液染5~10min(染色時間與溫度、染液成熟度有關)。(3)自來水換數(shù)次,標本轉(zhuǎn)為深藍色。(4)分色:浸入1%稀鹽酸乙醇液(100ml75%乙醇溶液中加1d鹽酸)分色數(shù)秒鐘至1min,脫去多余的藍浮色,標本轉(zhuǎn)為淡紫紅色鏡下呈紫紅色,胞質(zhì)無色或灰藍色(后者為幼稚細胞)。(5)藍化:自來水浸洗10min或數(shù)小時,甚至更長,標本從淡紫紅色轉(zhuǎn)為鮮艷的淺藍色。注意:為縮短自來水浸洗時間,使蘇木素更加顯色,可將標本置淡氨水溶液(400ml自來水加氨水2滴)中10min,切片很快呈鮮艷的淺藍色,經(jīng)此處理的標本,要經(jīng)自來水充分浸洗,否則會影響伊紅染色。(6)蒸餾水漂洗。(7)伊紅染液5~10min,進行對比染色。(8)用蒸餾水洗去玻片的浮色,經(jīng)70%、80%、90%梯度乙醇溶液脫水各一次,再分別經(jīng)95%、100%乙醇溶液脫水各兩次,每次1min。(9)浸入二甲苯兩次,每次1min。中性樹膠封片【注意事項】(1)Harris蘇木精染液即配即用,不能久存,宜少量配用。(2)HE染色時,除大批標本采取浸染外,一般以滴染為好。染液反復使用而被水稀釋,使特異性染色和染色速度下降。(3)蘇木精染液出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,是染液變質(zhì)的一種指示,但濾液仍可使用一段時間。蘇木精染液效力判斷方法為:將蘇木精染液滴人自來水中,若染液出現(xiàn)由紫紅色變?yōu)樗{色的現(xiàn)象,即證實染液有效。(4)蘇木精染色后,鹽酸乙醇溶液分色是關鍵步驟:以細胞核染色清晰、細胞質(zhì)基本無色為佳。核過染,延長分色時間;染色太淺,則應重新染色。(5)伊紅染色后,低濃度乙醇溶液脫水后極易脫色:為防止此現(xiàn)象的發(fā)生,標本脫水至95%乙醇溶液后,再轉(zhuǎn)入95%乙醇溶液配制的1%伊紅液中復染3~5min分鐘,然后繼續(xù)脫水透明,可獲得滿意效果。(6)無水酒精脫水后,轉(zhuǎn)入二甲苯中出現(xiàn)混濁現(xiàn)象,為脫水不徹底的表現(xiàn)。此時應退回乙醇溶液或更換100%乙醇重新脫水。(7)封片時,蓋玻片要大于切片。切片裸露,標本很快褪色。(8)市售95%乙醇溶液常含雜質(zhì),只能用于脫水或清潔玻片。(9)二甲苯是一種易揮發(fā)的有毒液體,實驗者要帶眼罩、口罩、手套,在通風的地方操作。[詳細]
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2018-11-26 10:00
產(chǎn)品樣冊
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蘇木精原液配方
- 配方配制步驟:1.將蘇木精溶于少量酒精中,加冰醋酸后攪拌,加速其溶解;2.加入甘油及其余酒精;3.研碎鋁鉀,溶于水中并加溫;4.將加溫的鋁鉀溶液一滴滴地加入染色劑中,并不斷攪動;5.瓶口用雙層紗布包扎,放于通風處,并經(jīng)常搖動,直到顏色變?yōu)樽霞t時即可使用,成熟時間約需2-4周以致數(shù)月之久,若加0.2g碘酸鈉即可立即成熟。已成熟的原液,須用瓶塞密封,置低溫暗處長期保存。使用時以原液1份加入50%酒精與冰醋酸等量混合液1份或2份。第二種配方材料蘇木精2g,無水乙醇250ml,硫酸鋁10g,蒸餾水750ml,碘酸鈉0.5g,檸檬酸1g。方法將蘇木精溶于無水乙醇,將硫酸鋁溶于水,兩液混合加熱煮沸2min,加入碘酸鈉及檸檬酸。更多相關產(chǎn)品》》》人熱休克蛋白27elisa試劑盒D2RElisa試劑盒前白蛋白測試盒TSIElisa試劑盒HISElisa試劑盒cath-KElisa試劑盒催乳素測試盒人免疫YZ酸性蛋白elisa試劑盒尿素酶相關蛋白C測試盒促腎上皮質(zhì)激素釋放激素測試盒人外顯肽elisa試劑盒LBPElisa試劑盒人分泌成分elisa試劑盒SFMCElisa試劑盒胰島素受體β測試盒血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白測試盒紅細胞膜蛋白測試盒胰島素受體β測試盒ASPElisa試劑盒人谷氨酸脫羧酶自身抗體elisa試劑盒蘇木精原液配方:**種蘇木精(2g),冰醋酸(10ml),甘油(100ml),95%酒精(100ml),蒸餾水(100ml),硫酸鋁鉀(5g)[詳細]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色
- 主要用途精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)染色試劑是一種旨在使用伊紅染料致死亡精子著色從而確定細胞活力的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,著色清晰,建立自動化和標準化體系。技術背景在男科學(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(acrosomalreaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。使用伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)染色技術,是精子活力分析的Z常用的方法。基于活體精子細胞的膜完整性,作為細胞染色劑之一的伊紅受到活體精子細胞(包括游動性和非游動性精子)的排斥,而死亡精子細胞攝入染料顯示紅色,同時苯胺黑作為復染,使背景呈現(xiàn)深色,增強對比度。通過常用的一般光學顯微鏡(無需相差顯微鏡;phase-contrastmicroscope)便可清晰觀察到細胞染色情況,同時可以定量計數(shù)。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Calcofluor熒光染色 使用說明
- 供應商:上海經(jīng)科化學科技有限公司服務熱線:400-0199-638QQ:472482400(上海經(jīng)科)微信號:shjkchem活動:消費積分可換充值卡!中文:Calcofluor熒光染色英文:CalcofluorFluorescentStain貨號:C-CLFR規(guī)格:5g價格:1504元類別:染色試劑簡介:Megazymes高純輔助因子和染料用于生物化學酶法測定和分析。說明書:點擊上面“”[詳細]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 精子活力伊紅苯胺黑(eosin-nigrosin)一步法染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
課件
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天狼星紅染色液|使用說明
- 詳細說明:貨號:G1471產(chǎn)品名稱:天狼星紅染色液規(guī)格:100ml儲存條件:4℃,避光,12個月。產(chǎn)品特點:Leagene天狼星紅染色液主要由天狼星紅染色液、Mayer蘇木素染色液組成,主要用于各種組織病變時對膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,在普通光學顯微鏡下心臟血管等組織的膠原纖維被染成紅色,在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助作用。采用免疫組化技術也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維,但所用抗體昂貴,操作費時,而采用天狼星紅染色試劑便宜,操作簡單。商品貨號:產(chǎn)地規(guī)格價格G1471Solarbio100ml220.00元相關產(chǎn)品:P10154×蛋白上樣緩沖液(含DTT)A101030%丙烯酰胺(29:1)P1300-1SDS-PAGE凝膠制備試劑盒T10705×Tris-甘氨酸電泳緩沖液D106010×電泳轉(zhuǎn)移緩沖液PR1920彩虹245廣譜蛋白markerPR1700預染次高分子量蛋白markerSW3010膜封閉液DA1010DAB顯色試劑盒(20×)PE0010ECLPlus熒光檢測試劑(ECL超敏發(fā)光液)優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻歡迎新老客戶咨詢[詳細]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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革蘭氏染色液試劑盒使用說明
- 革蘭氏染色液試劑盒使用說明[詳細]
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2024-10-03 05:37
產(chǎn)品樣冊
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Hoechst 33342染色液(1mg/mL)使用說明
- Hoechst33342染色液(1mg/mL)使用說明北京索萊寶科技有限公司實驗室現(xiàn)貨供應貨號:C0031規(guī)格:1mL/1mL×10保存:-20℃避光保存,一年有效。產(chǎn)品簡介:Hoechst33342,也稱bisBenzimideH33342或HOE33342,是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。Hoechst33342染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst33342也常用于普通的細胞核染色,或常規(guī)的DNA染色。Hoechst33342的Zda激發(fā)波長為346nm,Zda發(fā)射波長為460nm;Hoechst33342和雙鏈DNA結(jié)合后,Zda激發(fā)波長為350nm,Zda發(fā)射波長為461nm。本Hoechst33342染色液為即用型,可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。使用說明:使用前用生理鹽水或PBS將Hoechst33342染色液稀釋100倍,即為工作液。1.對于固定的細胞或組織:a.對于細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色,則先進行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行Hoechst33342染色。如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的Hoechst33342染色。b.對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst33342工作液,覆蓋住樣品即可;對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品3倍體積的工作液,混勻。室溫放置3-5分鐘。c.吸除Hoechst33342染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。d.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細胞發(fā)生凋亡時,會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染。2.對于活細胞或組織:a.加入適當量Hoechst33342工作液,必須充分覆蓋住待染色的樣品,通常對于六孔板一個孔需加入1mL工作液,對于96孔板一個孔需加入100μL工作液。b.在適宜于細胞培養(yǎng)的溫度下培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液,用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進行熒光檢測。注意事項:?熒光染料都存在淬滅的問題,為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。建議染色后盡量當天完成檢測,活細胞或組織染色后應立即觀察。?為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。相關產(chǎn)品:C0040臺盼藍染色液(0.4%)C0060DAPI溶液(1mg/mL)C0080碘化丙錠PI溶液(1mg/mL)M1020MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒CA1020ANNEXINV-FITC/PI凋亡檢測試劑[詳細]
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2024-09-29 12:14
產(chǎn)品樣冊
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伊紅美藍培養(yǎng)基的配置方法說明書
- 常用的伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌,因其強烈分解乳糖而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+,故菌落被染成深紫色,從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。伊紅為酸性染料,美藍為堿性染料。當大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍結(jié)合形成紫黑色菌落,并帶有綠色金屬光澤。而產(chǎn)氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。在堿性環(huán)境中不分解乳糖產(chǎn)酸的細菌不著色,伊紅和美藍不能結(jié)合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養(yǎng)基上不生長。伊紅美藍培養(yǎng)基配置方法如下:1、材料:蛋白胨10g;磷酸氫二鉀2g;瓊脂20~30g;蒸餾水1000ml;2%伊紅水溶液20ml;0.5%美藍水溶液13ml。2、儲備培養(yǎng)基的制備:先將瓊脂加至900ml蒸餾水,加熱溶解,然后加入磷酸氫二鉀及蛋白胨,混勻使之溶解,再以蒸餾水補足至1000ml,調(diào)整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾,再加入乳糖,混勻后定量分裝于燒瓶內(nèi),置高壓蒸汽滅菌器內(nèi)以115℃滅菌20min,貯存于冷暗處備用。3、制法:將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正PH,分裝于燒瓶內(nèi),121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。[詳細]
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2024-09-29 00:12
產(chǎn)品樣冊
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節(jié)約能源的微波染色
- 節(jié)約能源的微波染色[詳細]
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2013-04-22 00:00
報價單
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硝酸銀染色詳細介紹
- 硝酸銀染色詳細介紹[詳細]
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2015-07-02 00:00
產(chǎn)品樣冊
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免疫組化染色試劑盒說明書
- 免疫組化染色試劑盒說明書[詳細]
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2014-06-23 00:00
課件
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亞甲基藍染色液|說明書
- 詳細說明:貨號:G1303產(chǎn)品名稱:亞甲基藍染色液/美藍染色液(1%)規(guī)格:100ml儲存條件:室溫,避光,12個月。產(chǎn)品特點:亞甲基藍(Methyleneblue)又稱美藍、次甲基藍、次甲藍等,主要由美藍、酒精、氫氧化鉀等組成,含水亞甲基藍的分子式為C16H24ClN3O3S,分子量為373.9,CAS號為7220-79-3。亞甲基藍染色液常用于絲綢、紙張、細菌、細胞等染色。因其容易氧化,染色結(jié)果不宜長久保存。溫馨提示:不可用于臨床ZL。商品貨號:產(chǎn)地規(guī)格價格G1303Solarbio100ml80.00元相關產(chǎn)品:P10154×蛋白上樣緩沖液(含DTT)A101030%丙烯酰胺(29:1)P1300-1SDS-PAGE凝膠制備試劑盒T10705×Tris-甘氨酸電泳緩沖液D106010×電泳轉(zhuǎn)移緩沖液PR1920彩虹245廣譜蛋白markerPR1700預染次高分子量蛋白markerSW3010膜封閉液DA1010DAB顯色試劑盒(20×)PE0010ECLPlus熒光檢測試劑(ECL超敏發(fā)光液)優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻歡迎新老客戶咨詢[詳細]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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LEICA染色/蓋片機ST5020
- LEICA染色/蓋片機ST5020[詳細]
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2024-09-15 10:07
實驗操作
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LEICA染色/蓋片機ST5010
- LEICA染色/蓋片機ST5010[詳細]
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2024-09-15 10:39
其它
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細胞染色方法總結(jié)
- 細胞染色方法總結(jié)[詳細]
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2024-09-28 21:53
產(chǎn)品樣冊
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蘇凈FKC-III
- FKC-III浮游菌采樣器[詳細]
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2024-09-28 01:25
產(chǎn)品樣冊
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普魯士蘭染色液原理方法(含鐵血黃素染色液)
- 原理方法:普魯士蘭法。臨床應用:適用于組織中含鐵血黃素沉著的鑒別染色。主要應用于顯示和證明組織內(nèi)局部的各種出血性病變。適用范圍:適宜組織石蠟切片染色。產(chǎn)品組成:A試劑(亞鐵氰化染料)2瓶;B試劑(促染劑)2瓶;C試劑(中性紅復染液)2瓶染色方法:1、切片脫蠟處理至蒸餾水充分洗;2、按順序,均勻滴入A液(亞鐵氰化染料)和B液(促染劑)各1~2滴,常溫下染色10~20分鐘;3、蒸餾水充分洗滌;4、滴入C液(1%中性紅復染液)復染2分鐘,蒸餾水洗;5、脫水、透明、封固、鏡檢。結(jié)果參考:含鐵血黃素脂肪呈蘭色,胞核呈紅色。有效期:十二個月。貯存:4℃保存。體會和說明:1、在全部染色操作中,應注意避免用生銹及其它可能造成鐵質(zhì)的普通水洗,而應用蒸餾水洗。2、染色至一定程度時,可鏡檢確定染色時間,如能用已知的陽性片作對照染色較為可靠。3、陳舊標本染色效果不好時,可用0.25%高錳酸鉀液處理切片30~40分鐘,水洗,再用1%草酸液漂白,可激活殘存的鐵離子,則有利于染色,但易出現(xiàn)假陽性,須注意鑒別。4、如含鐵量過多,染色時間應縮短。5、A試劑和B試劑瓶蓋切勿互用,以免試劑變質(zhì)。[詳細]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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COLOR Gram 革蘭氏染色儀
- COLOR Gram 革蘭氏染色儀[詳細]
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2016-06-02 00:00
選購指南
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DAB染色試劑盒使用說明書
- DAB染色試劑盒使用說明書[詳細]
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2015-04-21 00:00
其它
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