前言

維生素 B12 與食物中的蛋白質有關。在攝取之后，胃內的鹽酸會分離出其中的維生素 B12，隨后，維生素 B12 會與一種名為內因子 (intrinsic factor) 的化合物結合，以便被腸道吸收。由于可以促進新細胞生成、細胞維護以及 DNA 合成，維生素 B12 對人體健康至關重要。

國家市場監(jiān)督管理總局、國家衛(wèi)生健康委員會聯(lián)合發(fā)布了GB 5009.285-2022《食品中維生素B12的測定》等新標準，新國標于2022年12月30日實施。新標也擴大了維生素B12檢測的適用范圍，不僅適用于嬰幼兒食品、乳及乳制品的檢測，還可適用于肉、肉制品、食谷物、烘焙食品、果凍、飲料等樣品基質的檢測，檢測基質的擴展，樣品基質更復雜，目標物含量更低，采用液相色譜法測定維生素B12，嬰幼兒食品和乳品、肉與肉制品的檢出限為0.2μg/100g，定量限為0.5μg/100g。

實驗部分

儀器

采用包含以下模塊的賽里安LC6000高效液相色譜儀系統(tǒng)：

· 集成六通道真空脫氣的SCION LC6100四元泵

· SCION LC6210 高精度、低殘留自動進樣器

· SCION LC6310 柱溫箱

· SCION LC6410 紫外檢測器/ SCION LC6430二極管陣列檢測器

液相色譜條件

表1 方法參數(shù)

試劑及標準品

三氟乙酸溶液（CAS: 76-05-1）, 乙腈溶液(HPLC級), 維生素B12 (產(chǎn)品批號：S074085）

結果

示例圖譜

圖1 維生素B12 200ng/ml示例色譜圖

圖2 維生素B12 3D紫外吸收全譜圖（190nm-400nm）

標準曲線

將維生素B12標準溶液依次稀釋為30、60、90、150、200ng/ml，使用外標法進行標準定量 ，以濃度為橫坐標峰面積為縱坐標作外標工作曲線 ；維生素B12響應值和濃度呈良好的線性關系，所得到的相關系數(shù)在0 .9999以上，詳見圖3。

圖3 維生素B12標準曲線

重現(xiàn)性

維生素B12峰面積RSD%1.18（n=6），保留時間RSD%0.30（n=6）結果見表2

表2 維生素B12定量定性

檢出限

維生素B12檢出限為10ng/ml，維生素B12Z小檢出限見圖4

圖4 維生素B12Z小檢出限

結論

本應用使用帶有紫外檢測器/二極管陣列檢測器和反相 C18色譜柱的賽里安LC6000快速分析食品中的維生素B12的方法，該方法配置合理、線性良好、靈敏度高可以滿足并優(yōu)于國家標準GB 5009.285-2022食品中維生素B12的測定方法。