樣品提取

(1)?稱取1g均質(zhì)樣品于50mL離心管中，加入5mLMcllvaine緩沖液和2mL；

(2) 渦旋混合2 min，4000 rpm下離心10 min 收集上清液

(3) 下層殘留物依次用5 mL和2.5 mLMcllvaine緩沖液重復提取兩次，合并 三次提取液，作為上樣液，待凈化。 *Mcllvaine緩沖液(pH4.0)：稱取磷酸氫二鈉、檸檬酸 乙二胺四乙酸二鈉鹽 用水溶解后稀釋并定容至1000mL

凈化-ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.# 68004)

a 活化： 依次加入6 mL 甲醇和6 mL 水，流出液棄去；

b 上樣： 將上樣液加入小柱中*，流出液棄去；

c 淋洗： 依次用6 mL 水和6 mL 10% 的甲醇水溶液淋洗，流出液棄去，將小柱抽干；

d 洗脫： 10 mL 甲醇洗脫，收集洗脫液

e 重新溶解：40 oC 下將洗脫液減壓蒸餾至近干，用流動相溶解并定容至1 mL 后HPLC 分析。

* 由于樣品量超過柱容量，應(yīng)分次上樣或在SPE 柱上安裝20 mL 儲液管 (Cat.#4811)，適配器 (Cat.#4803)

色譜柱：Spursil C18 150×4.6mm ID 5μm (Cat. #82001)

流速：1.0 mL/min

檢測器：UV 365 nm

柱溫：30

進樣量：20 μL

流動相A：0.01 mol/L草酸水溶液 流動相B：乙腈+甲醇（1+1）

適用于雞蛋中土霉素、四環(huán)素、金霉素和QL霉素的檢測

1 土霉素 2 四環(huán)素 3 金霉素 4 QL霉素