樣品提取

(1)稱取5 g均質(zhì)樣品于50 mL離心管中，加入20 mLMcllvaine緩沖液

(2)渦旋混合2 min，4000 rpm下離心5min，收集上清液；

(3)將下層殘留物依次用20mL，10 mLMcllvaine緩沖液重復(fù)提取兩次，合并 三次提取液，并定容至50 mL；

(4)將提取液用快速濾紙過濾，收集濾液，取10 mL濾液，作為上樣液，待凈化。

該步驟僅供參考，使用者可根據(jù)實驗室現(xiàn)有過濾設(shè)備進行調(diào)整，例如用砂芯漏斗

SPE柱凈化——ProElut PLS 60mg/3mL（Cat.#68003）

活化：依次加入3 mL甲醇，3 mL水，流出液棄去。

上樣：將上樣液加入柱中，流出液棄去。

淋洗：PLS依次用3mL水，3mL5%的甲醇水溶液淋洗，流出液棄去，然 后將PLS柱抽干。

洗脫：3 mL甲醇洗脫，收集洗脫液。

重新溶解：在40℃下用減壓蒸餾將洗脫液濃縮至近干，然后用流動相重新 定容至1mL。

由于上清液的量大于柱管體積，應(yīng)分次上樣，或者在PLS柱上加20mL儲液管（Cat.#4811）適配器（Cat.#4803）.

色譜柱：Spursil C18 150×4.6mm ID 5μm（Cat.#82001） 流速：1.0 mL/min 檢測器：UV 365 nm 柱溫：30℃ 進樣量：20 μL 流動相A：0.01 mol/L草酸水溶液 流動相B：乙腈：甲醇（1+1）！

適用于動物組織中土霉素、四環(huán)素、金霉素和QL霉素的檢測。

1 土霉素、 2 四環(huán)素、 3金霉素 3 QL霉素