1、提取

液態(tài)奶取20 mL；固態(tài)奶制品類稱取2 g，加入20 mL 水稀釋。

加入20 mL Mcllvaine 緩沖液*，渦旋混合2 min，4,000 rpm 以上離心10 min。

取20 mL 上清液，作為上樣液待凈化。

*Mcllvaine 緩沖液(pH 4.0) ：稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O) 27.6 g、檸檬酸(C6H8O7·H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g，用水溶解后稀釋并定容至1,000 mL。

2、凈化-ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)

活化：依次加入6 mL甲醇，6 mL水，流出液棄去。

上樣：將上述待凈化液加入柱中，流出液棄去。

淋洗：依次用6 mL水，6 mL10%的甲醇水溶液淋洗，流出液棄去，然后將PLS柱抽干。

洗脫：6 mL甲醇洗脫，流出液收集。

重新溶解： 將洗脫液在40℃減壓濃縮至近干，然后用流動相重新定容至1mL. 由于上清液的量大于柱管體積，應(yīng)分次上樣，或者在PLS柱上加20mL儲液管（Cat#4811）適配器（Cat#4803）。

色譜柱：Spursil C18 150×4.6mm ID 5μm Cat.#82001

流速：1.0 mL/min

檢測器：UV 365 nm

柱溫： 30℃

進(jìn)樣量：20 μL

流動相A： 0.01 mol/L草酸水溶液 流動相B：乙腈甲醇=1:1

適用于液態(tài)奶、固態(tài)奶制品中土霉素、四環(huán)素、金霉素和QL霉素的檢測。

1 土霉素、 2 四環(huán)素、 3 金霉素、 4 QL霉素