樣品準(zhǔn)備

將土壤樣品或沉積物冷凍干燥后，過20目篩，待檢測。

樣品提取

(1) 稱取1g樣品于15 mL離心管中，加入10 mL樣品提取液*；

(2) 渦旋混合5 min， 4000 rpm下離心2 min，收集上清液；

(3) 將下層殘留物按照（1）、（2）步驟重復(fù)提取兩次，合并三次樣品提取液，并用超純水稀釋至100 mL，混勻，待凈化。

樣品提取液：

Mcllvaine緩沖液*：甲醇（1:1）； *Mcllvaine緩沖液(pH 4.0)：稱取磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O）27.6 g、檸檬酸（C6H8O7·H2O）12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g,用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

SPE柱凈化——ProElut PLS 200 mg/6 mL（Cat.#68012）

(1)活 化： 依次加入6 mL甲醇，6 mL水，流出液棄去。

(2)上 樣： 將上樣液加入柱中*，流出液棄去。

(3)淋 洗： 用6 mL水淋洗小柱，流出液棄去，然后將PLS柱抽干。

(4)洗 脫： 20 mL1%乙酸甲醇洗脫，收集洗脫液。

(5)重新溶解： 在45 ℃下用減壓蒸餾將洗脫液濃縮至近干，然后用流動相重新定容至1mL。微孔濾膜*過濾后供儀器分析。

*由于上清液的量大于柱管體積，應(yīng)分次上樣，或者在PLS柱上加20mL儲液管（Cat.#4811）,適配器（Cat.#4803）。

*微孔濾膜一般采用0.22 um尼龍膜（Cat.#37177）。

色譜柱： Spursil C18 150×4.6mm ID，5μm（Cat.#82001） 流 速： 1.0 mL/min 檢測器：* UV 365 nm 柱 溫： 30 ℃ 進(jìn)樣量： 20 μL 流動相A： 0.01 mol/L草酸水溶液 流動相B： 乙腈:甲醇 (1:1)

適用于土壤中土霉素、四環(huán)素、金霉素和QL霉素的檢測。