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一、樣品提取
準確稱取牛奶 / 豬肉試樣 5.00 g(精確至 0.01)于 50 mL 離 心管中,加入 10 mL EDTA-Mellvaine 緩沖液,渦旋 1 min,超 聲提取 10 min,再于 4000 r/min 下離心 5 min,取上清液, 按上述步驟再提取兩次,離心,合并三次上清液,用 EDTAMellvaine 緩沖液定容至 30 mL 備用。
二、SPE 柱凈化(Copure? HLB,200 mg/6 mL)
活化:凈化前固相萃取柱依次使用 6 mL 甲醇活化、6 mL 水 平衡。
上樣和洗脫:取 10 mL 上清液上樣,棄去流出液,加 2 mL 5% 甲醇水溶液淋洗,棄去淋洗液,將小柱抽干,再用 6 mL 甲醇 洗脫并收集洗脫液。
重新溶解:洗脫液于 50℃下氮吹至近干,加 1 mL 甲醇重新溶解,渦旋混勻,過 0.22 μm 有機濾膜,待上機測試。
三、儀器條件
設備:Waters Alliance 2695 色譜柱:InerSustain?-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測器:Waters 2487 紫外檢測器 檢測波長:254 nm 流動相:A:乙腈 B:0.1% 甲酸水溶液 洗脫方式:梯度洗脫,見表 1
表 1 流動相梯度洗脫


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