樣品準(zhǔn)備/提取

2.1稱量：

牛奶：稱取2.0 g樣品，極ng確到0.01 g，置于10 mL帶刻度具塞試管；?

奶粉：稱取0.5 g，極ng確到0.01 g，置于10 mL帶刻度具塞試管。

2.2 提取

將稱好的樣品用水定容至10 mL。

2.3 衍生

取1 mL提取液和2 mL0.5 mg/mL2、4-二硝基苯肼*溶液于5 mL具塞試管中，混勻，60℃水浴30 min。

*2.4-二硝基苯肼溶液：50 mg2、4-二硝基苯肼用0.5%乙酸乙腈定容至100 mL。

3 SPE柱凈化

ProElut PXC 150 mg/6 mL（Cat.#68204）

(1)活 化：依次加入6 mL甲醇、6 mL水，流出液棄去，并將小柱抽干；

(2)上 樣：將2 mL衍生液加入柱中，收集流出液。

(3)洗 脫：1 mL乙腈，繼續(xù)收集流出液。

合并兩次流出液并定容至3 mL；過(guò)微孔濾膜，供HPLC分析。

色譜柱：Diamonsil C18（2），250 mm×4.6mm 5μm（Cat.#99603）

流 速：1.0 mL/min

檢測(cè)器：*UV 365 nm

柱 溫：40℃

進(jìn)樣量：20 μL

流動(dòng)相：乙腈：水=60:40