1、樣品準(zhǔn)備

?將15 mL 牛奶( 或3 g 奶粉、15 mL 水) 與15 mL 乙腈加入塑料離心管，渦旋混合2 min，6000rpm 下離心5 min ；

?取20 mL 上清液于另一離心管，加入15 mL 正己烷，渦旋混合2 min，6000 rpm下離心2 min，棄去正己烷，加入15 mL 正己烷重復(fù)操作一次；

?向下層清液中加入15 mL 乙酸乙酯，渦旋混合2 min，6000 rpm 下離心2 min，收集上層清液；

15 mL 乙酸乙酯重復(fù)提取一次，合并上清液。

將乙酸乙酯提取液在30 oC 下減壓蒸餾至近干，用6 mL 30% 甲醇水溶液分兩次溶解殘?jiān)齼艋?/p>

2、凈化 ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003)?

a 活化： 3 mL 甲醇活化、3 mL 水平衡；

b 上樣： 將待凈化液加入小柱，流出液棄去；

c 淋洗： 3 mL 30% 甲醇水溶液淋洗，淋洗液棄去，然后將小柱抽干；

d 洗脫： 3 mL 甲醇洗脫，收集洗脫液；

e 重新溶解：30oC 下將洗脫液減壓蒸餾至近干，1 mL 流動(dòng)相溶解，微孔濾膜過濾后供HPLC 分析

注：e 步驟是供參考的，使用者可根據(jù)自己使用的分析儀器進(jìn)行調(diào)整。

流速：1 mL/min

進(jìn)樣量：20 μL

檢測器：UV 280 nm

柱溫：30 oC

流動(dòng)相：甲醇/ 水=50/50 注：本方法中，目標(biāo)化合物是由HPLC 測定的，但這并不表明其他儀器不適合。

當(dāng)使用者采用其他方式進(jìn)行檢測時(shí)，同樣可以采用本方法進(jìn)行樣品前處理。

適用于奶和奶粉中氯霉素的檢測。

1 氯霉素