供試品溶液制備:
取2.0g藥材粉末, 加50ml戊烷回流提取15分鐘脫脂,去除戊烷層,藥渣再用50ml甲醇回流提取,過濾,濾液濃縮至3ml,離心5min取上清液即可作為供試品溶液
對(duì)照品溶液制備:
精密秤取,1mg阿曼托黃素0.5mg兒茶素0.1mg7-羥-6-甲氧香豆素,分別用10ml甲醇溶解,作為對(duì)照品溶液
顯 色 劑 的 配 制:
硫酸試劑:20ml的濃硫酸小心加入180ml的冷甲醇到中即可
NP試劑:1.0g diphenylborinic acid aminoethylester 用200ml乙酸乙酯溶解即可
FBS試劑:0.5gFBS用100ml蒸餾水溶解即可
色譜條件:
薄層板:HPTLC 硅膠60 F254 (Merck),10×10cm 或10×20cm
展開劑:氯仿-丙酮-甲酸(130:53:17)
點(diǎn)樣量及點(diǎn)樣位置:取供試品溶液和對(duì)照品溶液各3uL,
條帶寬8mm:空白間隔:至少2mm,底邊距:8mm
展開方式:用10×10cm 或20×10cm雙槽層析缸,每個(gè)槽中加入5mL或10mL展開劑,加濾紙飽和20分鐘
展距:60mm(從底邊計(jì)起)上行展開后,取出,用熱風(fēng)干燥5分鐘
檢測:a)UV254nm b)硫酸試劑:硫酸顯色劑顯色后,冷風(fēng)干燥,然后在UV366nm下檢測
c)薄層板于100加熱5min,在可見光下檢測d) 在UV366nm下檢測 e)NP試劑:薄層板于100加熱5min后, 趁熱于NP試劑中浸漬,干燥,然后在紫外366nm檢測 f)FBS試劑:薄層板再噴以FBS試劑至呈棕色,然后在可見光下檢測
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