氨基酸的HPLC分析通常主要采用三種方法進(jìn)行分析:(1)柱后標(biāo)識(shí):使用離子交換色譜柱分離樣品后,使樣品與OPA或茚三酮等衍生劑反應(yīng),然后用UV或熒光法進(jìn)行檢測(cè);(2)柱前標(biāo)識(shí):用色譜柱分離預(yù)先與衍生劑反應(yīng)的分析物,然后用UV熒光或MS方法檢測(cè);(3)直接分析:用色譜柱分離后,無(wú)需衍生化就使用MS檢測(cè)樣品
通過(guò)直接法分離利用了反相色譜法或使用離子對(duì)試劑的親水作用色譜法(HILIC),本報(bào)告介紹的是使用HILIC法進(jìn)行直接分析的應(yīng)用
除了17種蛋白氨基酸外,還選擇?;撬幔ㄘ悮ぶ泻校┎璋彼?氨基丁酸(GABA)(包括和異構(gòu)體,茶葉中含有)進(jìn)行分析,總共22種物質(zhì)使用TSKgel NH2-100 3 m氨基柱和甲酸/甲酸銨水溶液和乙腈進(jìn)行梯度洗脫分離使用ESI電離法處理各氨基酸的質(zhì)子化分子[M+H]+,用作檢測(cè)離子在該分析條件下,亮氨酸異亮氨酸和GABA(和異構(gòu)體)的分離效果令人滿意另外,在該分析條件下制備的各氨基酸校準(zhǔn)曲線在5到500 mol/L的濃度范圍內(nèi)都呈現(xiàn)出良好線性 TSKgel NH2-100,3um TSKgel NH2-100,3um TSKgel NH2-100,3um
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