凈化:ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)?

1、提取

(1)稱取5 克樣品，加入25mLMcllvaine緩沖液

(2)充分振蕩，并渦旋混合，直至樣品完全溶解，待凈化。 注：Mcllvaine 緩沖液(pH 4) ：稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4?12H2O)27.6g、檸檬酸(C6H8O7?H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g，用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

2、凈化 ProElut PLS 150mg/6mL（Cat.#68004）

(1)活 化：依次加入5mL甲醇，5mL水，流出液棄去。

(2)上 樣：將溶解好的樣品溶液加入柱中，流出液棄去。

(3)淋 洗：依次用5mL水，5mL5%的甲醇水溶液淋洗，流出液棄去，然后將PLS柱抽干。

(4)洗 脫：5mL甲醇洗脫，流出液收集。 (5)重新溶解：*將洗脫液在40℃減壓濃縮至近干，然后用流動(dòng)相重新定容至1mL。 注：由于上清液的量大于柱管體積，應(yīng)分次上樣，或在PLS 柱上加20 mL 儲(chǔ)液管(Cat.#4811)，適配器(Cat.#4803)

色譜柱： Spursil C18 150×4.6mm ID，5μm(Cat.#82001)

流 速： 1.0 mL/min

檢測(cè)器： UV 365 nm

柱 溫： 30 ℃

進(jìn)樣量： 20 μL

流動(dòng)相A： 0.01mol/L草酸水溶液 流動(dòng)相B： 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 時(shí)間0min-10.0min 流動(dòng)相B從30%到50%；10.0min~10.5min 流動(dòng)相B從50%到30%；10.5min~20min流動(dòng)相B為30%。

適用于蜂蜜中四環(huán)素類藥物的分析。

1. 土霉素；2. 四環(huán)素；3. 金霉素