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儀器網(wǎng)/ 應(yīng)用方案/ 牛奶中四環(huán)素的測定

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方法:
SPE/HPLC
基質(zhì):
奶及奶制品
應(yīng)用編號(hào):
101052
化合物:
四環(huán)素;土霉素;金霉素
SPE柱:
ProElut PLS 150mg / 6mL 30/pk
色譜柱:
Spursil C18 5μm 150 x 4.6mm
樣品前處理:

1、提取

(1)將20mL牛奶和20mL Mcllvaine緩沖液加入50mL塑料離心管中;

(2)將樣品渦旋混合2 min,4000 rpm以上離心10 min;

(3)取20mL上清液,待凈化。

注:Mcllvaine 緩沖液(pH 4) / 稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4?12H2O)27.6g、檸檬酸(C6H8O7?H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g,用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

2、凈化

ProElut PLS 150mg/6mL(Cat.#68004)

(1)活 化:依次加入5mL甲醇,5mL水,流出液棄去。

(2)上 樣:將20mL提取液加入柱中,流出液棄去。

(3)淋 洗:依次用5mL水,5mL5%的甲醇水溶液淋洗,流出液棄去,然后將PLS柱抽干。

(4)洗 脫:5mL甲醇洗脫,流出液收集。

(5)重新溶解:*將洗脫液在40℃減壓濃縮至近干,然后用流動(dòng)相重新定容至1mL。

注:由于上清液的量大于柱管體積,應(yīng)分次上樣,或在PLS 柱上加20 mL 儲(chǔ)液管(Cat.#4811),適配器(Cat.#4803)

色譜條件:

流 速: 1.0 mL/min

檢測器: UV 365 nm

柱 溫: 30 ℃

進(jìn)樣量: 20 μL

流動(dòng)相A: 0.01mol/L草酸水溶液 流動(dòng)相B: 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 時(shí)間0-10.01min 流動(dòng)相B從30%到50%;10.01~10.5min 流動(dòng)相B從50%到30%;10.5~20min流動(dòng)相B為30%。

文章出處:
P098
關(guān)鍵字:
牛奶,四環(huán)素,Spursil C18 ,四環(huán)素;土霉素;金霉素
摘要:

適用于牛奶中四環(huán)素類藥物的測定。

圖譜:

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