凈化:ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003)?

1 樣品準(zhǔn)備/提取

(1)稱(chēng)取5 克樣品于塑料離心管中，加入20 mL Mcllvaine緩沖液；

(2)渦旋混合2min，然后超聲 10min，4000 rpm下離心1 min，收集上清液；

(3)將下層殘留物分別再用20mL、10mL Mcllvaine緩沖液再提取兩次，重復(fù)上述操作，將三次提取的上清液并入離心管中，4000rpm下，離心10min；

(4)*將上清液用快速濾紙過(guò)濾，留下濾液，待凈化。

注：該步驟僅供參考，使用者可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有過(guò)濾設(shè)備進(jìn)行調(diào)整。

2 SPE柱凈化——ProElut PLS 60mg/3mL（Cat.#68003）

(1)活 化：依次加入3mL甲醇，3mL水，流出液棄去。

(2)上 樣：將待凈化的濾液加入柱中，流出液棄去。

(3)淋 洗：依次用3mL水，3mL5%的甲醇水溶液淋洗，流出液棄去，然后將PLS柱抽干。

(4)洗 脫：3mL甲醇洗脫，流出液收集。

(5)重新溶解：*將洗脫液在40℃減壓濃縮至近干，然后用流動(dòng)相重新定容至1mL。

流 速： 1.0 mL/min 檢測(cè)器： UV 365 nm 柱 溫： 30 ℃ 進(jìn)樣量： 20 μL 流動(dòng)相A： 0.01mol/L草酸水溶液 流動(dòng)相B： 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 時(shí)間0min-10.0min 流動(dòng)相B從30%到50%；10.0min~10.5min 流動(dòng)相B從50%到30%；10.5min~20min流動(dòng)相B為30%。

適用于禽、畜、水產(chǎn)品組織中四環(huán)素類(lèi)藥物的檢測(cè)。

1. 土霉素；2. 四環(huán)素；3. 金霉素