四環(huán)素類藥物是由放線菌產(chǎn)生的一類廣譜抗生素，包括四環(huán)素、金霉素、土霉素等；磺胺類藥物為人工合成的抗 菌藥，具有抗 菌譜較廣、性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，包括乙?；前?、磺胺吡啶、磺胺嘧啶等；喹諾酮類藥物是人工合成的含4-喹諾酮基本結(jié)構(gòu)的抗 菌藥，包括諾氟沙星、依諾沙星、環(huán)丙沙星等；這三類藥物在養(yǎng)殖業(yè)中常用來預(yù)防及治 療畜禽疾病，但若使用不當(dāng)會導(dǎo)致其在動物源性食品中殘留超標(biāo), 影響人類健康。

 安譜實(shí)驗(yàn)參照《GB 31658.17-2021 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》，使用HLB Pro 固相萃取小柱及Athena UHPLC C18 液相色譜柱，結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對豬肉、豬肝、雞肉、雞肝基質(zhì)中的四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量進(jìn)行測定，方法回收率高，精密度好，滿足國標(biāo)檢測要求。

樣品前處理

基質(zhì)：豬肉、豬肝、雞肉、雞肝

提取：稱取1 g（準(zhǔn)確至±0.01 g）基質(zhì)樣品，加Mcllvaine Na2EDTA緩沖液8mL，漩渦1min，超聲20min，-2℃、10000r/min離心5min，收集上清液，殘?jiān)屑恿姿猁}緩沖液8mL，重復(fù)提取1次，合并2次提取液，混勻，待SPE凈化。

SPE小柱：CNW Poly-Sery HLB Pro SPE小柱，200mg/6mL（SBEQ-CA6685）

活化：5mL甲醇

平衡：5mL水

上樣：提取液

淋洗：5mL水，5mL20%甲醇水溶液，抽干

洗脫：10mL洗脫液（甲醇：乙酸乙酯=1：1）

收集洗脫液，氮吹至近干，加復(fù)溶液1.0mL，渦旋1min，14000r/min離心5min，取上清液過0.22μm濾器，上機(jī)分析。

復(fù)溶液：取水40ml，加甲醇5ml、乙腈5ml、甲酸0.05ml，混勻

備注：氮?dú)鉂饪s至剛好吹干(切記不可長時(shí)間吹干)

色譜條件

液相色譜條件

a) 色譜柱：Athena UHPLC C18，2.1 * 50 mm，1.8 μm （LAEQ-2105UA）；

b) 柱溫：35℃；

c) 流速：0.3 mL/min；

d) 進(jìn)樣量：10 μL；

e) 流動相：A. 0.1%甲酸水溶液；B. 甲醇：乙腈（2:8，含0.1%甲酸，體積比）溶液。梯度洗脫程序見表1。

表1流動相及梯度洗脫條件

質(zhì)譜條件

a) 離子化模式：電噴霧離子源（ESI），正離子模式；

b) 碰撞氣(CAD): 8 psi

c)  簾氣(CUR): 35 psi

d)  離子源氣體 1(GS1): 60 psi

e)  離子源氣體 2(GS2): 65 psi

f）離子噴霧電壓 (IS): 5000.0 V

g)  加熱溫度(TEM): 500.0℃ 

h)  離子對信息參數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)類似

（去簇電壓、碰撞能等參數(shù)設(shè)置與儀器相關(guān)，若需要具體參數(shù)，可詢安譜實(shí)驗(yàn)業(yè)務(wù)員）

實(shí)驗(yàn)譜圖

圖1 豬肉基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液（50ng/mL）譜圖

圖2 豬肉空白樣品譜圖

圖3 豬肉加標(biāo)樣品（50ng/mL）譜圖

注：由于數(shù)據(jù)較多僅羅列部分重要物質(zhì)譜圖展示

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

基質(zhì)加標(biāo)樣品回收率數(shù)據(jù)如下表：

表2 豬肉基質(zhì)加標(biāo)樣品回收率數(shù)據(jù)

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

參照《GB 31658.17-2021 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》，使用HLB Pro 固相萃取小柱及Athena UHPLC C18 液相色譜柱進(jìn)行不同種類基質(zhì)驗(yàn)證，結(jié)果表明豬肉、豬肝、雞肉和雞肝4種基質(zhì)中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類36個(gè)目標(biāo)物的加標(biāo)回收率大部分在70%-110%之間，RSD小于10，回收率良好，滿足國標(biāo)檢測要求。

產(chǎn)品推薦