因為蛋白質(zhì)中的含氮量相當(dāng)恒定（約14%一18%），平均含量約為16%因此，凱氏法測定蛋白質(zhì)氮乘以6.25%即為蛋白質(zhì)含量 用以下方法直接測定（凱氏法） 測定的流程是，稱取0.2-0.5g風(fēng)干的植物材料，放入100ml燒杯中，加入50ml水，煮沸5min，在40-50下保溫30min徐徐加入10ml6%硫酸銅，搖勻，靜置lh（或過夜）過濾，殘渣按凱氏定氮法將殘渣消化，蒸餾，測定收集液中氨，計算得出含氮量非蛋白質(zhì)氮包括溶于水的氮化物，如氨基酸酸性氮和有機含氮堿等 非蛋白質(zhì)氮總量=總氮蛋白質(zhì)氮計算得出 也可以按下法測定，即：稱取0.2-0.5g植物樣品，放入研缽中加2ml水，研磨成勻漿態(tài)加入3ml3%硫酸銅溶液，搖勻，勻漿轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，同時以8ml水沖洗凈殘渣 離心管放入沸水中，用玻璃棒攪拌3min取出加入3ml0.2mol/L的NaOH，攪勻，靜放10min，離心將溶液放入100ml凱氏瓶中，用熱水沖洗沉淀2次，每次用10ml，每次沖洗時要向沖洗的水中加人l滴3%的硫酸銅溶液 然后向凱氏瓶的浸出物中加入2ml濃硫酸，O.3m110%鉬酸鈉（10gNa2MoO4·2H2O溶解于100m1水中，加入0.5ml2mol/LNaOH，加熱至沸，并煮沸15min，冷卻后補充無氨水100ml），4滴3%過氧化氫放在電爐上蒸發(fā)，直至出現(xiàn)泡沫，然后降低溫度以免泡沫濺到瓶頸上繼續(xù)用微火加熱直至硫酸出現(xiàn)白色蒸汽 之后用球形玻璃塞塞上凱氏瓶口，增強火力，消化到溶液透明為止冷卻后向瓶中殘留物加入10ml水溶液轉(zhuǎn)人50ml容量瓶中，用水沖洗殘渣，并補加水到50ml，混勻取25ml溶液放人燒杯中滴定加1滴0.1%甲基橙溶液，冷卻后，以2mol/LNaOH溶液滴定，直到指示劑呈現(xiàn)黃色為止，不能滴定過頭然后加10ml含有溴酸鉀的pH6.7的磷酸緩沖液和5ml0.12mol/L氯氨溶液（15g氯氨溶于水中，用水稀釋到1L，混勻，用棉花過濾后，裝入暗色瓶中），即用玻璃蓋蓋住燒杯，以圓周運動方式將溶液混勻，并靜置25min，其后加入2ml2%碘酸鉀溶液，10m18%草酸溶液 在有淀粉指示劑存在下，用0.02mol/L硫代硫酸鈉溶液滴定釋放出來的的碘1ml0.02mol二硫代硫酸鈉相當(dāng)于0.09338mg氮另按此法設(shè)不加樣品的對照，操作步驟完全與上相同 Z后按下面公式計算樣品中的非蛋白氮含量 X（非蛋白氮含量%）=[0.4667×50×K×（6z-6）1/（25×7n）=[0.9338×K×（a-b）]/72 式中： 50為試液體積（ml）； 25為用氯氨法測定時所取試液的體積（ml）； a為滴定對照所用去的0.02mol二硫代硫酸鈉體積（ml）； b為滴定試液所用去的0.02mol/L硫代硫酸鈉體積（ml）； K為硫代硫酸鈉溶液的滴定度372為分析的樣品重 沛歐SKD-100凱氏定氮儀--蛋白質(zhì)測定儀 沛歐SKD-600定氮儀--蛋白質(zhì)測定儀