樣品與濃硫酸共熱含氮有機物即分解產(chǎn)生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨經(jīng)強堿堿化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據(jù)此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量若以甘氨酸為例,其反應(yīng)式如下:
nH2CH2COOH+3H2SO42CO2+3SO2+4H2O+nH3 (1)
2nH3+H2SO4(nH4)2SO4 (2)
(nH4)2SO4+2NaOH2H2O+Na2SO4+2nH3 (3)
反應(yīng)(1)(2)在凱氏瓶內(nèi)完成,反應(yīng)(3)在凱氏蒸餾裝置中進行
為了加速消化,可以加入CuSO4作催化劑,K2SO4以提高溶液的沸點收集氨可用硼酸溶液,滴定則用強酸實驗和計算方法這里從略
計算所得結(jié)果為樣品總氮量,如欲求得樣品中蛋白含量,應(yīng)將總氮量減去非蛋白氮即得如欲進一步求得樣品中蛋白質(zhì)的含量,即用樣品中蛋白氮乘以6.25即得
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