1 前言

白葡萄球菌粉是經(jīng)現(xiàn)代生物工程技術深層培養(yǎng)、精制而成的。為黃褐色粉末；有似干酵母臭，無味。由非致病性表皮葡萄球菌（白色葡萄球菌）液體培養(yǎng)而得的滅活干燥菌體制成。本品及相關制劑作為止 咳藥，適用于慢性支氣管炎等呼吸道疾病引起的咳嗽、痰多。本實驗參照《ZG藥典 2020 年版 第四部 0731 蛋白質(zhì)含量測定 DY法 凱氏定氮法》對白葡萄球菌粉中的蛋白質(zhì)含量進行測定。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

K1160 全自動凱氏定氮儀，分析天平 。

2.2 試劑

20g/L 硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，400g/L 氫氧化鈉，0.02mol/L 硫酸或鹽酸標準滴定液。

3 實驗方法

3.1 樣品制備

非蛋白氮供試品溶液的制備：精密量取供試品適量（2020 版藥典中規(guī)定如供試品為凍干制劑或固體粉末時，應復溶后量取，且蛋白質(zhì)含量不高于 0.2g。由于本樣品復溶困難，即稱取 0.3~0.4g 樣品。），置 20mL 容量瓶中，加水 10mL，10%鎢酸鈉溶液 2mL，0.33moL/L 硫酸溶液 2mL，加水至刻度，搖勻，靜置 30 分鐘，過濾，棄去初濾液（約3~5mL），取續(xù)濾液作為非蛋白氮供試溶液。

3.2 取樣

總氮供試品稱取 0.05g（2020 版藥典中規(guī)定如供試品為凍干制劑或固體粉末時，應用 0.9%氯化鈉溶液定量稀釋成每 1mL 中含氮量約 1mg 的溶液，然后量取 1mL 進行測定。由于本樣品復溶困難，即稱取 0.05g 樣品。），非蛋白氮供試品量取 2mL 非蛋白氮溶液加入消化管中，各加入 3g 硫酸鉀與 0.2 硫酸銅水，再沿瓶壁滴加硫酸 10ml。

3.3 消解

設定消解參數(shù)

表 1 消解參數(shù)設置

3.4 測試

定氮儀參數(shù)設置如下表。

表 2 定氮儀參數(shù)設置

4 結果與討論

4.1 實驗結果

表 3 白葡萄球菌粉中的蛋白質(zhì)含量測試結果

4.2 結論

測試結果顯示本次測試的白葡萄球菌粉中的蛋白質(zhì)含量為 29.556%。 

參考文獻

[1]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[ M ] . 四部. 北京: ZG醫(yī)藥科技出版社, 2020: 附錄 0731 蛋白質(zhì)含量測定 DY法凱氏定氮法

注意事項

1）該樣品為粉末樣品，因此依據(jù)藥典在樣品制備時應制備成合適濃度的溶液進行測試，如樣品復溶困難可直接稱取相應重量樣品進行測試。

2）本實驗中蛋白質(zhì)含量=（總氮含量-非蛋白氮含量）*6.25。

標簽：全自動凱氏定氮儀