LC98-II型GX液相色譜儀在原料乳與乳制品三聚氰胺檢測中的應(yīng)用 北京溫分分析儀器技術(shù)開發(fā)有限公司 孫高祥 內(nèi)蒙古旺旺工廠 丁小偉 新疆石河子旺旺乳制品廠 靳嫵媚 1 前言 依據(jù)GB/T 223882008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法，本文提供了LC98-II型GX液相色譜儀（HPLC）對原料乳及乳制品中三聚氰胺的GX液相色譜（HPLC）檢測方法 2 范圍 GB/T 223882008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法中，提出GX液相色譜法的定量限為2 mg/kg，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法的定量限為0.01 mg/kg而本文所提供的LC98-II型GX液相色譜儀（HPLC）對原料乳與乳制品中三聚氰胺的定量檢測限可達(dá)0.05mg/kg 3 GX液相色譜法 3.1 原理 試樣用三溶液-乙腈提取，經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化后，用GX液相色譜測定，外標(biāo)法定量 3.2 試劑與材料 均按GB/T 223882008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法的3.2操作 3.3 儀器和設(shè)備 3.3.1 LC98-II型GX液相色譜儀（北京溫分分析儀器技術(shù)開發(fā)有限公司）：配有P98-II型高壓輸液泵及UV98-II型紫外檢測器 3.3.2 分析天平：感量為0.0001 g和0.01 g 3.3.3 離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于4000 r/min 3.3.4 超聲波水浴 3.3.5 固相萃取裝置 3.3.6 氮?dú)獯蹈蓛x 3.3.7 渦旋混合器 3.3.8 具塞塑料離心管：50 mL 3.3.9 研缽 3.4 樣品處理 均按GB/T 223882008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法的3.4操作 3.5 GX液相色譜測定 3.5.1 HPLC 參考條件 a) 色譜柱：C8柱，250 mm×4.6 mm，5 m，或C18柱，250 mm×4.6 mm，5 m b) 流動相：C8柱，離子對試劑緩沖液（3.2.10）-乙腈（85+15，體積比），混勻C18柱，離子對試劑緩沖液（3.2.10）-乙腈（90+10，體積比），混勻 c) 流速：1.0 mL/min d) 柱溫：40 e) 波長：240 nm f) 進(jìn)樣量：20 L 3.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 用流動相將三聚氰胺(CAS No:108781)標(biāo)準(zhǔn)儲備液逐級稀釋得到的濃度為0.10.82204080 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作液， 濃度由低到高進(jìn)樣檢測，以峰面積-濃度作圖，得到圖A所示標(biāo)準(zhǔn)曲線 圖A 標(biāo)準(zhǔn)曲線 3.5.3 定量測定 待測樣(旺旺集團(tuán)提供)液中三聚氰胺的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析下圖所示濃度為0.1mg/kg三聚氰胺待測樣色譜圖及數(shù)據(jù) 3.5.4 結(jié)果計算 試樣中三聚氰胺的含量由色譜數(shù)據(jù)處理軟件或按式（1）計算獲得： A × c × V×1000 X= × f （1） As × m×1000 式中： X 試樣中三聚氰胺的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）； A 樣液中三聚氰胺的峰面積； c 標(biāo)準(zhǔn)溶液中三聚氰胺的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）； V 樣液Z終定容體積，單位為毫升（mL）； As 標(biāo)準(zhǔn)溶液中三聚氰胺的峰面積； m 試樣的質(zhì)量，單位為克（g）； f 稀釋倍數(shù) 3.6 空白實驗 除不稱取樣品外，均按上述測定條件和步驟進(jìn)行 3.7 儀器定量檢測限 LC98-II型GX液相色譜儀（HPLC）的噪聲指標(biāo)為5X10-U/mV(50µV)，按式（1）計算，可得LC98-II型GX液相色譜儀（HPLC）對原料乳與乳制品中三聚氰胺的定量檢測限可達(dá)0.05mg/kg 3.8 回收率 在添加濃度2 mg/kg～10 mg/kg濃度范圍內(nèi)，回收率在80%～110%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10% 3.9 允許差 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的差值不得超過算術(shù)平均值的10% 3.10 結(jié)論 本文所提供的LC98-II型GX液相色譜儀（HPLC）對原料乳與乳制品中三聚氰胺的定量檢測限可達(dá)0.05mg/kg遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于GB/T 223882008規(guī)定的2mg/kg定量檢測限，為GB/T 223882008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法中規(guī)定的定量限的1/40