前言

三聚氰胺（Melamine），屬于非蛋白類含氮有 機(jī)化學(xué)品，常作為化工原料用于塑料、包裝材料 的生產(chǎn)工藝中。2008 年的多起嬰兒腎結(jié)石病例的三聚氰胺奶粉事件轟動(dòng)全國(guó)，使得三聚氰胺質(zhì)量安全問題一度成為社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)。 2011 年 4 月 6 日，衛(wèi)生部等 5 部門在關(guān)于三聚氰胺在食品中的限量值的公告中明確規(guī)定：三聚氰胺不是食品原料，也不是食品添加劑，禁止人為添加到食品中。對(duì)在食品中人為添加三聚氰胺的，依法追究法律責(zé)任。

Abstract

本應(yīng)用參考 GB/T 22388-2008  標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)方法，介紹了使用賽里安 LC6000 GX液相色譜儀（搭配紫外 檢測(cè)器）檢測(cè)原料乳及乳制品中三聚氰胺的應(yīng)用方案。實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確， 重復(fù)性優(yōu)異、線性良好 (R2=0.9997)， 完全滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

實(shí)驗(yàn)方法

原理：試樣用三lyu乙酸 - 乙腈提取，經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化后，用GX液相色譜測(cè)定，外標(biāo)法定量。

儀器：使用配備了 6100 泵、6210 自動(dòng)進(jìn)樣器、6310 柱溫箱和 6410 紫外檢測(cè)器的賽里安 LC6000 GX液相色譜儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。使用 CompassCDS 工作站進(jìn)行曲線擬合和數(shù)據(jù)分析。

三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品：CAS 108-78-01，純度＞ 99.0%

離子對(duì)試劑緩沖液：準(zhǔn)確稱取 2.10g 檸檬酸和 2.16g 辛烷磺酸鈉，加入 980mL 水溶解，調(diào) PH 至 3.0 后定容 1L備用。

三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取 100mg（精確到 0.1mg）三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品于 100mL 容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定容到刻度，配置成濃度 1mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于 4℃避光儲(chǔ)存。

色譜條件

色譜柱：C18，5um， 4.6 mm x 250mm

流動(dòng)相：離子對(duì)試劑：乙腈 = 10：90

流速：1.0ml/min 

柱溫：40℃

進(jìn)樣量：20μL

檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖 1. 20 μg /mL 的 三聚氰胺標(biāo)樣色譜圖

用流動(dòng)相將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋得到濃度為 0.8、2.0、20.0、40.0、80.0 μg /mL 的標(biāo)準(zhǔn)工作液，濃度由低到高進(jìn)樣檢測(cè)，以峰面積 - 濃度作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。

圖 2. 0.8-80 μg /mL 的 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)曲線（R2=0.9997）

GB/T 22388-2008 中規(guī)定兩次重復(fù)JD差值不得超過算術(shù) 平方值 10%。由圖 3 和表 1 可知結(jié)果完全符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

圖 3. 20μg /mL 的三聚氰胺重疊色譜圖（n=6）

表 1 三聚氰胺的保留時(shí)間和峰面積值重復(fù)性（n=6）

GB/T 22388-2008 中規(guī)定三聚氰胺定量限為 2 1.15mg/kg。對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè)，從市場(chǎng)上隨機(jī)購(gòu)買了液體乳制品前處理后進(jìn)行檢測(cè)分析，結(jié)果為 1.15mg/kg 未超出標(biāo)準(zhǔn)限值。圖 4 為實(shí)際樣品譜圖。

圖 4. 實(shí)際樣品中三聚氰胺的色譜圖

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

賽里安 LC6000 GX液相色譜儀提供了原料乳與乳制品中的三聚氰胺檢測(cè)的解決方案。該方案使用 UV 檢測(cè)器檢測(cè)三聚氰胺完全符合 GB/T 22388-2008 的檢測(cè)要求，線性優(yōu)異（R2=0.9997），保留時(shí)間與峰面積重復(fù)性均符合標(biāo)準(zhǔn)要求（保留時(shí)間和峰面積 的 RSD％值分別為 0.028 和 0.97 ）。

標(biāo)簽：高效液相色譜儀