關(guān)于溶劑效應(yīng)問題

我們在液相或液質(zhì)分析過程中，會經(jīng)常遇到峰前延、色譜峰展寬，分叉等，百思不得其解！原來問題就出在”溶劑效應(yīng)“上，那”溶劑效應(yīng)“到底是怎樣影響色譜分析的呢？小編簡要描述一下，

溶劑效應(yīng)主要由于樣品溶劑與流動相匹配性不好，究其原因，樣品溶液（包括樣品分子和溶劑分子）在進樣過程中實際上存在著三個進程，一是樣品分子與流動相混合，二是樣品分子與固定相發(fā)生相互作用，三是樣品分子在流動相的推動下被洗脫。當(dāng)樣品到達色譜柱時樣品的這三個進程是同時進行的，一旦樣品溶液與流動相兼容性不好，樣品未能充分進入良好的預(yù)分離狀態(tài)即被倉促洗脫，就會產(chǎn)生引起怪異峰型的溶劑效應(yīng)，影響分離度和分析結(jié)果的準確性。

溶劑效應(yīng)引起的幾種異常峰形

為避免溶劑效應(yīng)，采取“不得已”措施：

用流動相溶解樣品，或者減少進樣量，輕松搞定溶劑效應(yīng)問題，So Easy！可是，可是……

表面上是解決了溶劑效應(yīng)問題，但是為了解決溶劑效應(yīng)的問題，卻給分析檢測工作帶來的極大不便。

都是“溶劑效應(yīng)”惹得禍

痛點1：農(nóng)殘、獸殘檢測方法，大部分SPE或QuEChERS凈化后，為解決溶劑效應(yīng)問題，往往需要0.5-3小時的氮吹和溶劑置換，費時費力。不但需要消耗大量的氮氣費用，而且效率極其低下，還影響了化合物回收率。

痛點2：有些農(nóng)殘方法（比如：GB 23200.121-2021）數(shù)十種或上百種農(nóng)殘同時檢測，為減少溶劑效應(yīng)，標準采取的是進樣量（2ul）。這對儀器的靈敏度要求較高，不少檢測工作者反映，2ul進樣不準，誤差大，同時有些儀器達不到檢測靈敏度要求，但提高進樣量，溶劑效應(yīng)會比較嚴重。

痛點3：極性較強的物質(zhì)出峰非常早，比如甲胺磷，往往會出現(xiàn)雙峰或嚴重的峰形前沿，為解決這個問題，檢測工作者，不得不額外在氣相上單獨做甲胺磷等極性較強的物質(zhì)，費時費力。

痛點4：中藥、中成藥、指紋圖譜等的分析，成分復(fù)雜，峰太多，初始流動相通常有機相比例都很低，而樣品的前處理往往有機溶劑比例較高，容易出現(xiàn)溶劑效應(yīng)，為解決這個問題，需要耗時耗力的吹干復(fù)溶過程，成本太高。

痛點5：藥典或國標等權(quán)威部門制定的方法不能隨意改變，更換樣品溶劑通常認為是對方法的改變，一般不被允許， 如要改變，須得通過一系列復(fù)雜的方法學(xué)驗證之后才可以，這時無法避免出現(xiàn)溶劑效應(yīng)，對藥品含量或雜質(zhì)的檢測影響較大

溶劑效應(yīng)消除器，讓您檢測效率&效果翻倍

優(yōu)勢一：提高效率，省去氮吹，提高效率

應(yīng)用：GB 31656.8-2021水產(chǎn)品中有機磷農(nóng)藥的測定

GB 31656.8-2021水產(chǎn)品中有機磷農(nóng)藥，增加溶劑效應(yīng)消除器

效果1：省去了氮吹過程（2-3小時），凈化后，過濾膜直接進樣，避免了氮吹濃縮過程帶來的有機磷農(nóng)藥的降解和揮發(fā)，簡便了操作過程，提高了回收率。

效果2：在多農(nóng)殘分析時，能有效改善有機磷的峰型，消除了溶劑效應(yīng)帶來的影響。

效果3：對于儀器比較老或儀器靈敏度低， 能提高進樣量，從2 ul加大到5 ul到10 ul ， 進一步降低檢測限。

樣品前處理：

譜圖對比：

左:10uL進樣（ 未加），右：10 uL（柱前增加溶劑效應(yīng)消除器）

方法來源：客戶

優(yōu)勢二：加大上樣量，改善農(nóng)殘峰形問題

應(yīng)用：GB 23200.121-2021 375種多農(nóng)殘檢測

GB 23200.121-2021 375種多農(nóng)殘，增加溶劑效應(yīng)消除器

效果1：對于375種多農(nóng)殘檢測，由于用戶液質(zhì)設(shè)備靈敏度不高，小劑量進樣無法滿足設(shè)備檢測要求，使用溶劑效應(yīng)消除器后，進樣量可直接從 2ul 加大到 10ul，

效果2：不但極大的提高了靈敏度， 而且沒出現(xiàn)溶劑效應(yīng)。

效果3：即使是老設(shè)備也能滿足多農(nóng)殘檢測的靈敏度要求，節(jié)省了大筆固定資產(chǎn)購置成本。

譜圖對比：

左：10ul 進樣量 ( 未加） 右：10ul 進樣量 ( 柱前加溶劑效應(yīng)消除器）

方法來源：客戶

優(yōu)勢三、解決極性化合物峰形問題

應(yīng)用：GB 23200.121-2021 果蔬中46種農(nóng)藥殘留的測定

GB 23200.121-2021 果蔬中46種常檢農(nóng)藥，增加溶劑效應(yīng)消除器

效果1：GB23200.121中的甲胺磷，由于甲胺磷極性較強，在色譜柱上不易保留，即使有保留，出峰時間常，極易受到溶劑效應(yīng)的影響，導(dǎo)致峰分叉或出現(xiàn)兩個峰。使用溶劑效應(yīng)消除器后，較好解決了甲胺磷峰形問題，峰形更好，響應(yīng)更高。

效果2：GB23200.121中分離不好的物質(zhì)，包含甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜、滅蠅胺、霜霉威、阿維菌素，結(jié)合溶劑效應(yīng)消除器，進樣量可以從2 uL加大到5 uL，同樣有完美的峰型，進一步降低了檢出限。

效果3：46種農(nóng)殘常檢項目，只需10分鐘內(nèi)正負離子同時監(jiān)測即可完成檢測，其中甲胺磷、滅蠅胺無需單獨分析，效率提高3倍，分離效果更好。

譜圖對比：

進樣2μL其中的甲胺磷對比圖

GB 23200.121-2021 溶劑效應(yīng)消除器的應(yīng)用對比圖

來源：客戶

優(yōu)勢四、優(yōu)化藥物檢測峰形和雜質(zhì)檢出

應(yīng)用：丹參制劑的分析

應(yīng)用：利培酮的有關(guān)物質(zhì)分析

應(yīng)用：冬蟲夏草中腺苷的分析(2020版藥典方法)

Q&A

1、Q：溶劑效應(yīng)消除器除了以上應(yīng)用外，還有哪些應(yīng)用呢？

 A：由于篇幅有限，農(nóng)殘、獸餐、制藥各選了幾個有代表性的應(yīng)用。還可以廣泛應(yīng)用于藥物代謝、中藥農(nóng)殘、中藥指紋圖譜、環(huán)境檢測等。優(yōu)化實驗過程，提高實驗效率，改善峰形。同時，對于部分儀器靈敏度較低的儀器，加了溶劑效應(yīng)消除器后，可加大上樣量等。

2、Q：溶劑效應(yīng)產(chǎn)生的根源？

 A：溶劑效應(yīng)的產(chǎn)生是由于樣品溶劑與流動相不匹配引起的，樣品溶劑與流動相的“不匹配”包括：

（1）二者的洗脫能力差異；

（2）二者的互溶能力差異；

（3）樣品分子在二者中的溶解性差異；

（4）樣品分子在二者中分子態(tài)和離子態(tài)的分布差異；

3、Q：溶劑效應(yīng)消除器簡介？

 A：歷時5年潛心打磨和研發(fā)的新產(chǎn)品，可有效解決樣品溶劑與流動相匹配性不好而產(chǎn)生的各類色譜問題：

• 顯著改善峰形、提高柱效

• 色譜基線更平穩(wěn)、出峰時間更穩(wěn)定

• 提高分離度和雜質(zhì)檢出能力

• 極大程度降低樣品溶劑和流動相差異所產(chǎn)生的色譜分析問題

4、Q：溶劑效應(yīng)消除器的工作原理？

A：溶劑效應(yīng)主要產(chǎn)生于進樣過程，由于樣品溶劑與流動相匹配性不好，導(dǎo)致進樣過程中樣品分子在進入色譜柱進行正式的色譜保留行為前，樣品溶劑對樣品分子的濃度分布造成了擾動，雖然這種擾動持續(xù)的時間短，但由于此時樣品濃度很大，因此即使輕微的擾動仍可對樣品分子在色譜柱內(nèi)的濃度分布造成極大的影響。溶劑效應(yīng)消除器正如表述一樣，它所起到的作用就是抹平樣品溶劑與流動相之間的差異，讓兩者的兼容性與匹配性更好，在進樣過程中起到了一個緩沖作用。

空腔結(jié)構(gòu)——容納流動相，拉平樣品溶劑與流動相的差異；

材質(zhì)：316L不銹鋼+Peek材質(zhì)——耐腐蝕、長壽命。

5、Q：溶劑效應(yīng)消除器技術(shù)難點和突破點？

A：

• 突破了死體積越小越好的傳統(tǒng)色譜理論; 

• 創(chuàng)造性的引入了柱前死體積，柱效成倍提高; 

• 實現(xiàn)了“增加死體積”和“提高柱效”這兩個在傳統(tǒng)理論上相悖情形的對立統(tǒng)一。

6、Q：溶劑效應(yīng)消除器的安裝位置？

A：溶劑效應(yīng)消除器的尺寸，大小與分析保護柱相當(dāng)；溶劑效應(yīng)消除器有方向，按箭頭指示方向安裝；接于進樣閥與色譜柱之間（如有保護柱則需接在保護柱前）。

7、Q：溶劑效應(yīng)消除器進樣量情況？

A：溶劑效應(yīng)消除器的空腔體積有一定的限度，它能消除溶劑效應(yīng)的容量是有限的，只有在一定的進樣量范圍內(nèi)才能表現(xiàn)出好的效果。Solvs-AB（分析型） 的推薦進樣量為1-20ul，Solvs-UP（超高壓型）的推薦進樣量為1-10ul。