凈化：ProElut C18 500 mg/6 mL (Cat.#63105) 或ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)?

1、提取 5 g 蜂蜜加入25 mL 水，劇烈振蕩，使蜂蜜完全溶于水中。

2、凈化 ProElut C18 500 mg/6 mL (Cat.#63105) 或ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)

a 活化： 向柱中依次加入6 mL 甲醇、6 mL 水，流出液棄去；

b 上樣： 將樣品加入柱中*，流出液棄去；

c 淋洗： 用6 mL 水淋洗小柱，淋洗液棄去，然后抽干小柱；

d 洗脫： 用6 mL 乙腈洗脫，收集洗脫液 收集的洗脫液可進行兩種不同處理，以便適合兩種不同的分析方法： 重新溶解： 50 oC 下將凈化液氮氣吹干，1 mL 乙腈溶解殘渣，微孔濾膜過濾后，LC-MS/MS 分析； 衍生化處理: 50 oC 下將洗脫液氮氣吹干，加入100 μL N- 甲基咪唑- 乙腈溶液（1/1），渦旋混合30 s，然后加入150 μL 三氟乙酸酐- 乙腈溶液（1/1），渦旋混合30 s，然后加入750 μL 甲醇，靜置15 min，微孔濾膜過濾后HPLC 分析

注： 由于樣品量超過柱容量，應分次上樣或在SPE 柱上安裝60 mL 儲液管 (Cat.#4812)，適配器 (Cat.#4803)

方法1，HPLC 色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99601)

流動相：甲醇/ 水=92/8 (V/V)

流速：1.0 mL/min

進樣量：20 μL

柱溫：25 oC 檢測器

熒光檢測器，激發(fā)波長：365 nm ；發(fā)射波長：475 nm

方法2，LC-MS 色譜柱：Diamonsil C18(2) 150 x 2.1 mm ID, 3 μm (Cat. #99613)?

流動相：乙腈/ 0.1% 乙酸水溶液=75/25

流速：0.2 mL/min

進樣量：10 μL

柱溫：30 oC

檢測器：串聯(lián)質譜，APCI 負離子模式

適用于蜂蜜中阿維菌素的檢測。

1. 阿維菌素