（第 一法和第二法）

藥包材中

環(huán)氧乙烷的測定

        藥品包裝是指使用合適的材料或容器、利用包裝技術(shù)對(duì)藥物制劑的半成品或成品進(jìn)行分（灌）、封、裝、貼簽等操作，為藥品提供品質(zhì)保證、鑒定商標(biāo)與說明的加工過程。

        長期以來注射用藥物的包裝一直采用西林瓶或安瓿，使用時(shí)抽入注射器后再進(jìn)行注射。而預(yù)灌封注射器則把液體藥物直接裝入注射器中保存，使用時(shí)簡單方便，高品質(zhì)的注射器組件與藥物有良好的相容性，同時(shí)注射器本身具有很好的密封性，藥品可以長期儲(chǔ)存，兼具藥物儲(chǔ)存和普通注射兩種作用。

        它作為一種更高級(jí)別的藥包材，同樣也需要進(jìn)行滅菌處理。常見的滅菌方式包括環(huán)氧乙烷滅菌、蒸汽滅菌、輻照滅菌和電子束滅菌、過氧化氫低溫等離子體滅菌等。

01

環(huán)氧乙烷

這里著重介紹環(huán)氧乙烷滅菌：環(huán)氧乙烷（EO）是一種廣譜、劇毒的氣體滅菌劑。在一定溫度、壓力和濕度條件下，EO可與微生物蛋白質(zhì)和核酸分子中的相應(yīng)基團(tuán)發(fā)生烷基化反應(yīng)，使其失去活性，從而殺滅微生物。此外，EO也能抑 制微生物各種酶的活性，阻礙微生物的正常代謝，從而導(dǎo)致微生物死亡，以此達(dá)到滅菌的目的。

環(huán)氧乙烷滅菌的優(yōu)點(diǎn)是低溫低濕，穿透力強(qiáng)，可以深入到滅菌物品深處，殺滅大多數(shù)病原微生物，殺菌譜廣，成本低；而缺點(diǎn)是滅菌時(shí)間長，效率較低，排氣、解析管理水平要求較高，并且常常伴有化學(xué)殘留。而環(huán)氧乙烷是1類致癌物。因此，需要對(duì)藥包材環(huán)氧乙烷含量進(jìn)行限定。

近期，中國藥典發(fā)布了4209——藥包材環(huán)氧乙烷測定法公示稿，為此島津也針對(duì)性地進(jìn)行了方法的開發(fā)與驗(yàn)證，建立了藥包材（預(yù)灌封注射器）中環(huán)氧乙烷的氣相測定方法。

結(jié)果表明，參照《藥包材環(huán)氧乙烷測定法》公示稿中標(biāo)準(zhǔn)曲線法色譜條件，采用色譜柱 SH-624 分析藥包材（預(yù)灌封注射器）中環(huán)氧乙烷，環(huán)氧乙烷峰形對(duì)稱，理論塔板數(shù)大于 5000，且環(huán)氧乙烷與相鄰雜質(zhì)（如：乙醛）峰基線分離。此方法可為藥包材（預(yù)灌封注射器）中環(huán)氧乙烷的測定提供參考思路。

02

實(shí)驗(yàn)方案

01

實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材

Shimadzu GC-2030 氣相色譜儀；

HS-10 頂空進(jìn)樣器；

純水機(jī)：PR-FP-0120α-MT1（ 60L 水箱 + 取水器）

色譜柱：SH-624（30 m × 0.25 mm × 1.4 μm；P/N：R221-75863-30；S/N：1643391）；

SHIMSEN Arc Disc HPTFE 針式過濾器（P/N：380-00341-05）；

GC-MS 認(rèn)證樣品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34002-01）；

SHIMSEN Pipet 移液槍：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

1.2 對(duì)照品溶液的制備

        混合對(duì)照品溶液（0.4 μg/mL）：在 20 mL 頂空瓶中預(yù)先加入 5 mL 水，用微量注射器分別精密吸取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液母液（1 mg/mL，樣品溶劑為甲苯）、乙醛標(biāo)準(zhǔn)溶液母液（1 mg/mL，樣品溶劑為乙腈）適量，注入頂空瓶中，配成 0.4 μg/mL 的對(duì)照品溶液，立即壓蓋密閉，搖勻。

        混合對(duì)照品溶液（20 μg/mL）：在 20 mL 頂空瓶中預(yù)先加入 5 mL 水，用微量注射器分別精密吸取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液母液（1mg/mL，樣品溶劑為甲苯）、乙醛標(biāo)準(zhǔn)溶液母液（1 mg/mL，樣品溶劑為乙腈）適量，注入頂空瓶中，配成 20 μg/mL 的對(duì)照品溶液，立即壓蓋密閉，搖勻。

1.3 供試品溶液的制備

        吸入標(biāo)示裝量的水，在 37℃±1℃條件下恒溫 1 小時(shí)得到供試品溶液。取 5 mL 供試品溶液于20 mL 頂空瓶中，立即壓蓋密閉。

1.4 分析條件

色譜柱：SH-624（30 m × 0.25 mm × 1.4 μm；P/N：R221-75863-30）

升溫程序：50℃（保持 10 min），30 ℃/min 的速率升至 200℃（保持 7 min）

載氣：N2

進(jìn)樣口溫度：200 ℃

分流模式：分流（10：1）

控制模式：恒流模式

載氣流速：1.5 mL/min

檢測器：FID，溫度：250 ℃

HS 條件：頂空瓶平衡溫度為 60°C，平衡時(shí)間為 40 min

進(jìn)樣量：1 mL

02

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 色譜圖

        按照上述色譜條件（1.4）進(jìn)行采集，混合對(duì)照品溶液 

        色譜圖如下：

混合對(duì)照品溶液（0.4 μg/mL）

混合對(duì)照品溶液（20 μg/mL）

供試品溶液

2.2 線性范圍

        取 20 mL 頂空瓶 6 個(gè)，預(yù)先各加 5 mL 純水，用微量注射器吸取一定體積的環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液母液（1 mg/mL，樣品溶劑為甲苯）分別注入各頂空瓶中，立即壓蓋密封，配置成濃度分別為 0.4、1、2、5、10 和 20 μg/mL 的環(huán)氧乙烷系列對(duì)照品溶液，進(jìn)樣分析。以目標(biāo)物濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同樣方法配置 0.2 μg/mL 對(duì)照品溶液，進(jìn)樣分析，以 3 倍信噪比（RMS）計(jì)算環(huán)氧乙烷的儀器檢出限，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖 1，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)以及檢出限見表 1。

圖 1. 環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)曲線

表 1. 環(huán)氧乙烷線性相關(guān)系數(shù)及儀器檢出限

03

結(jié)論

        本文建立了藥包材（預(yù)灌封注射器）中環(huán)氧乙烷的氣相測定方法。結(jié)果表明，參照《藥包材環(huán)氧乙烷測定法公示稿》中第二法的色譜條件，采用色譜柱 SH-624 分析藥包材（預(yù)灌封注射器）中環(huán)氧乙烷，環(huán)氧乙烷峰形對(duì)稱，理論塔板數(shù)大于 5000，且環(huán)氧乙烷與相鄰雜質(zhì)（如：乙醛）峰基線分離。此方法可為藥包材（預(yù)灌封注射器）中環(huán)氧乙烷的測定提供參考。