1 前言

蛋白質(zhì)溶解比率，即大豆水溶性蛋白質(zhì)含量占大豆粗蛋白質(zhì)含量的百分率。水溶性蛋白質(zhì)，指的是可溶于水的蛋白質(zhì)?！禛B/T 31785-2015 大豆儲(chǔ)存品質(zhì)判定規(guī)則》中指出蛋白質(zhì)溶解比率是大豆儲(chǔ)存品質(zhì)關(guān)鍵指標(biāo)之一。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)國(guó)標(biāo)給出的方法對(duì)大豆的蛋白質(zhì)溶解比率進(jìn)行測(cè)定。

2 儀器與試劑

2.1儀器

K1160全自動(dòng)凱氏定氮儀，SH420F石墨消解儀，離心機(jī)，分析天平 。           

2.2試劑

硫酸（分析純），20g/L硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，40%氫氧化鈉，混合催化劑（3gK₂SO₄、0.2gCuSO₄），0.1mol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1粗蛋白測(cè)定

3.1.1試樣制備

將大豆粉碎使90%以上通過(guò)60目篩。

3.1.2取樣

稱取混合均勻的樣品0.2g（精確至0.1mg）左右，加入消化管。加入混合催化劑：3g硫酸鉀，0.2g硫酸銅，沿消化管壁加入濃硫酸10mL。

3.1.3消解

表1 消解參數(shù)設(shè)置

3.1.4測(cè)試

表2 定氮儀參數(shù)設(shè)置

3.2可溶性蛋白測(cè)定

3.2.1試樣制備

將大豆粉碎使90%以上通過(guò)60目篩。

3.2.2提取可溶性蛋白質(zhì)

稱取粉碎試樣5g（精確至0.01g，本次取5.00g）于磨口帶塞錐形瓶中，加水200mL，搖勻使均勻分散，然后在25℃~30℃溫度下震蕩2h，取出后將混合液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻后靜置1min~2min，將上層清液倒入離心管中，在轉(zhuǎn)速為1500r/min的離心機(jī)中離心10min，再將離心液用快速濾紙或玻璃纖維過(guò)濾，收集清晰濾液于錐形瓶中，即為樣品水溶性蛋白質(zhì)測(cè)定液。

3.2.3消解

吸取測(cè)定液10mL于消化管中，加入混合催化劑：3g硫酸鉀，0.2g硫酸銅，沿消化管壁加入濃硫酸10mL。

表3 消解參數(shù)設(shè)置

3.2.4測(cè)試

表4 定氮儀參數(shù)設(shè)置

4 結(jié)果與討論

4.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表5 大豆中蛋白質(zhì)溶解比率測(cè)試結(jié)果

式中50 為樣品定容稀釋倍數(shù)

4.2結(jié)論

測(cè)試結(jié)果顯示本次測(cè)試的大豆的蛋白質(zhì)溶解比率為81.74%，大于《GB/T 31785-2015 大豆儲(chǔ)存品質(zhì)判定規(guī)則》中規(guī)定的75%，屬宜存大豆。

參考文獻(xiàn)

[1] GB/T 31785-2015 大豆儲(chǔ)存品質(zhì)判定規(guī)則

[2] GB 5009.5-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定[ S ] .

標(biāo)簽：全自動(dòng)凱氏定氮儀