一、樣品提取 

稱取均質(zhì)豬肉試樣 10.00 ｇ試樣 ( 精確至 0.01 g)，加入 15 mL pH=5.2 的乙酸 - 乙酸銨緩沖溶液，1000 r/min 勻漿 1 min，再加入 β- 葡萄糖醛酸苷肽酶 / 芳香磺酸酯酶溶液 100μL，于 37℃ ±1℃振蕩酶解過夜。取出冷卻后，10℃ 9500 r/min 離心 10 min。取全部上清液。待凈化。

二、SPE 柱凈化（Copure? MCX，200 mg/6 mL）

活化：加入 6 mL 甲醇、6 mL 水、6 mL 0.1 mmol/L 高氯酸 (pH=4.0) 溶液活化。 

上樣和洗脫：當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即倒入上 述待凈化溶液，過柱，棄去濾液，用 2 mL 甲醇、2 mL 2% 甲醇水溶液淋洗，Z后用 7 mL 5% 氨化甲醇洗脫。 

重新溶解：洗脫液緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干，用甲醇 -0.1% 甲酸水溶液溶解定容至 1.0 mL，渦旋混勻 1 min，用于 LC-MS/ MS 測定。 

三、儀器條件 

質(zhì)譜儀：API 4000 色譜柱：Venusil ASB C18 (2.1 mm×150 mm, 5 μm) 流動(dòng)相：A：0.1% 甲酸水溶液 B：甲醇 洗脫方式：梯度洗脫，見表 1 

表 1 流動(dòng)相梯度洗脫程序