一、樣品提取 

稱取均質(zhì)后的豬肉 5.0 g，于 50 mL 離心管中，加乙酸乙酯 20 mL，渦旋 2 min，4000 r/min 離心 5 min，取上清液于 100 mL 雞心瓶中，殘?jiān)屑右宜嵋阴?20 mL，重復(fù)提取一次，合并 兩次提取液。雞心瓶中加 0.1 mol/L 鹽酸溶液 4 mL，于 40℃ 下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至少于 3 mL，轉(zhuǎn)至 10 mL 離心管中。用 0.1  mol/L 鹽酸溶液 2 mL 洗雞心瓶，轉(zhuǎn)至同一離心管中。再用正 己烷 3 mL 洗雞心瓶，將正己烷轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混勻 30 s，3000 r/min 離心 5min，棄正己烷。再次用正己烷 3 mL 洗雞心瓶，轉(zhuǎn)至同一離心管中，渦旋混勻 30 s，3000 r/min 離心 5 min，棄正己烷，取下層液備用。 

二、SPE 柱凈化（Copure? MCX，60 mg/3 mL） 

活化：MCX 柱依次用甲醇 2 mL 和 2 mL 0.1 mol/L 鹽酸溶液 活化。 

上樣和洗脫：取備用液過(guò)柱，控制流速 1 mL/min。依次用 1  mL 0.1 mol/L 鹽酸溶液和 2 mL 50% 甲醇乙腈溶液淋洗，棄去 淋洗液。用 4 mL 5% 氨化甲醇洗脫，收集洗脫液。 

重新溶解：洗脫液于 40℃氮?dú)獯蹈桑?1.0 mL 0.1％甲 酸乙腈溶液溶解殘余物，濾膜過(guò)濾，供高效液相色譜測(cè)定。 

三、儀器條件 設(shè)備：Waters Alliance 2695 色譜柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測(cè)器：Waters 2487 紫外檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm 流動(dòng)相：A：乙腈   B：0.1% 甲酸水溶液  洗脫方式：梯度洗脫，見(jiàn)表 1 流速：1 mL/min 進(jìn)樣體積：20 μL 

表 1 梯度洗脫條件