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一、樣品提取 

準(zhǔn)確稱取均質(zhì)后的豬肉 5.0 g 于 50 mL 離心管中加入水 20 mL, 甲醇 5 mL,渦旋 1 min,4500 r/min離心 5 min,取上清液,備用。 

二、SPE 柱凈化(Copure? HLB,60 mg/3 mL) 

活化:HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上樣和洗脫:往固相萃取柱中加入提取備用液,棄去流出液; 加入 3 mL 35% 甲醇水溶液淋洗,棄去淋洗液,抽干小柱;加 6 mL 甲醇洗脫,收集洗脫液(整個(gè)上樣、洗脫過(guò)程保持流速 1  mL/min)。 

重新溶解:40℃緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干,用 1 mL 甲醇 溶解,經(jīng) 0.22 μm 濾膜重新過(guò)濾,供 HPLC 測(cè)定。 

三、儀器條件 

設(shè)備:Waters Alliance 2695 色譜柱:XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測(cè)器:Waters 2487 紫外檢測(cè)器;  檢測(cè)波長(zhǎng):230 nm  流動(dòng)相:A:乙腈   B:水;  洗脫方式:梯度洗脫 

表 1 梯度洗脫條件

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