前言

全 球?qū)τ谌橹破分泄δ芴堑臄?shù)量和質(zhì)量的控制需求越來越高。乳果糖是一種在乳制品中發(fā)現(xiàn)的功能糖，當以少量攝入時，能夠調(diào)節(jié)腸道健康。乳果糖、乳糖和半乳糖的化學結(jié)構(gòu)非常相似，導致色譜分離困難。

本文開發(fā)了一種使用親水作用液相色譜（HILIC）檢測并完全分離乳果糖、乳糖和半乳糖的方法。HILIC是一種利用極性固定相和流動相（包含水和更少極性的溶劑，如乙腈）的一定比例的色譜技術(shù)。

實驗部分

01 儀器 

采用包含以下模塊的SCION（賽里安）LC6000高效液相色譜儀系統(tǒng)：

? 集成六通道真空脫氣的SCION LC6100四元泵

? SCION LC6210 高精度、低殘留自動進樣器

? SCION LC6320 立式柱溫箱

? SCION LC6460 RI示差檢測器

02 液相色譜條件 

表1. 方法參數(shù)

試劑及標準品

制備了包含每個目標分析物（乳果糖、乳糖和半乳糖）的校準標準品，濃度范圍從0.01%到0.05%。

結(jié)果

01 示例圖譜 

當分析功能糖時，Z關(guān)鍵的是完全分離每個目標化合物。圖1展示了使用HILICpak VG-50柱的分離度。

圖1.乳糖、乳果糖和半乳糖示例色譜圖

中國藥典（2020年版）描述了在使用RI檢測器和HILIC模式色譜分析功能糖時必須滿足的分離規(guī)范。中國藥典（2020年版）規(guī)定：“乳果糖和乳糖之間的分離度大于2.0”。

使用HILICpak VG-50色譜柱與SCION LC6000-RI檢測器相結(jié)合，所得到的分析分離度超過了藥典要求，且在15min內(nèi)完成分離，突顯了在HILIC模式下使用LC6000液相色譜儀時進行色譜分離的卓 越性能。下表是中國藥典（2020年版）規(guī)定的乳果糖到乳糖的分離度要求， LC6000完全滿足要求：

表2. 乳果糖和乳糖之間的分離度

02 標準曲線 

所有目標化合物在0.01%至0.05％濃度范圍內(nèi)的校準曲線。所有目標化合物表現(xiàn)出良好的線性，相關(guān)系數(shù)R2≥0.9991.詳見圖2、圖3、圖4。

圖2. 乳果糖標準曲線

圖3.半乳糖標準曲線

圖4. 乳糖標準曲線

結(jié)論

本應用使用SCION（賽里安）LC6000配置LC6460 RI檢測器，在HILIC模式下實現(xiàn)乳果糖、半乳糖和乳糖優(yōu)異的分離度和線性，并且在十五分鐘內(nèi)完成分析，該方法是應對復雜糖分析的理想解決方案。