1、提取

將雞蛋攪勻，稱取5 g 與5 mL 0.1 mol/L 磷酸二氫鉀溶液（NaOH 溶液調(diào)節(jié)pH 7.0）混合，振蕩提取5 min，6000 rpm 下離心10 min，上清液轉(zhuǎn)入另一離心管，5 mL 0.1 mol/L 磷酸二氫鉀溶液（NaOH溶液調(diào)節(jié)pH 7.0）重復(fù)提取一次，合并提取液。向提取液中加入10 mL 正己烷，劇烈振蕩1 min，4000 rpm 下離心1 min，棄去正己烷，加入10 mL 正己烷重新提取一次，正己烷棄去，下層水相待凈化。

2、凈化

a 活化： 依次將5 mL 乙腈、5 mL 提取液* 加入ProElut C18 500 mg/6mL (Cat.#63105)，流出液棄去；

b 上樣： 將待凈化溶液加入柱中，流出液棄去；

c 淋洗： 5 mL 水淋洗，淋洗液棄去，并將C18 柱抽干；

d 洗脫： 3 mL 磷酸/ 三乙胺混合溶液+ 乙腈（80+20）洗脫，收集洗脫液與5 mL 具塞試管中，加水定容至3 mL，微孔濾膜過(guò)濾后，HPLC 分析

注： 提取液：0.1 mol/L 磷酸二氫鉀溶液液（NaOH 溶液調(diào)節(jié)pH 7.0）； 磷酸/ 三乙胺混合溶液：3.4 mL 濃磷酸溶解在1000 mL 水中，滴加三乙胺調(diào)節(jié)pH 2.4

色譜柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流速：1.0 mL/min

進(jìn)樣量：20 μL

柱溫：室溫

流動(dòng)相：磷酸/ 三乙胺溶液+ 乙腈=80/10 (V/V) ；

注：磷酸/ 三乙胺溶液的配制：3.4 mL 濃磷酸溶解在1000 mL 水中，滴加三乙胺調(diào)節(jié)pH 2.4 檢測(cè)器：熒光檢測(cè)器，激發(fā)波長(zhǎng)：280 nm，發(fā)射波長(zhǎng)：450 nm

適用于雞蛋中環(huán)丙沙星、達(dá)氟沙星和恩諾沙星的檢測(cè)。