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二、樣品凈化(Copure? CPC 著色劑專用柱,500 mg/6 mL)
活化:小柱依次用 5 mL 甲醇活化,5 mL 水平衡。
上樣和洗脫:將上述待凈化液過柱,棄去流出液;然后依次 加入 5 mL 0.1% 甲酸水溶液,5 mL 水淋洗、小柱,棄去流出液; 抽干小柱,再加入 8 mL 15% 氨水甲醇溶液進行洗脫,收集洗 脫液。
重新溶解:將上述洗脫液于 45℃氮吹至約 1 mL,加水定容至 2 mL,渦旋混勻,過 0.45 μm PTFE 濾膜供上機測定。
注:建議使用 PTFE 親水材質濾膜過濾,避免其他材質濾膜 對色素有吸附造成回收率偏低現(xiàn)象。
三、儀器條件
儀器:Waters Alliance 2695 色譜柱:CommaSil? ODS(4.6 mm×250 mm,5 μm) 檢測器:Waters 2996 DAD 檢測器 流動相:A: 甲醇 B: 0.02 mol/L 乙酸銨緩沖液 洗脫方式:梯度洗脫,洗脫程序見表 1 流速:1.0 mL/min 檢測波長:400 nm-800 nm,取Z大值圖 進樣體積:10 μL
表 1 梯度洗脫程序



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