一、樣品提取 

1、大米 稱取粉碎后的大米 5.00 g（精確到 0.01 g）食品到 50 mL 離 心管，加 25 mL 70% 甲醇水溶液，振蕩 30 min，4000 r/min 下離心 5 min，取上清液 5 mL 于 15 mL 離心管中，加 10 mL 磷酸緩沖液，混勻待凈化。 

2、食用油 稱取 5.00 g（精確到 0.01g）食用油到 50 mL 離心管，加 1 g NaCl，20 mL 70% 甲醇水溶液，振蕩 30 min，4000 r/ min 下離心 5 min，取上清液 1 mL，加入 4 mL 水，混勻待 凈化。 

3、醬油 稱取 5.00 g（精確到 0.01 g）醬油到 50 mL 離心管，加 70% 甲醇水定容至 20 mL，超聲 5 min，振蕩 10 min，取上清液 1  mL，加入 4 mL 水，混勻待凈化。

 4、葡萄干 稱取攪碎 5.00 g（精確到 0.01 g）葡萄干到 50 mL 離心管， 加提取液（稱取 150.0 g 氯化鈉、20.0 g 碳酸氫鈉溶于約 950  mL 水中 , 加水定容至 1 L）20 mL，超聲 5 min，振蕩 5 min， 4000 r/min 離心 5 min，取上清液 1 mL 到 4 mL 磷酸緩沖溶液， 混勻待凈化。

 5、白酒 取白酒 5.00 g（精確到 0.01 g）到 50 mL 離心管，加碳酸氫 鈉溶液（10 g/L）定容至 20 mL，振蕩 15 min，取上清液 1 mL 到 4 mL 磷酸緩沖溶液，混勻待凈化。 磷酸緩沖溶液：稱取 8.0 g氯化鈉、1.2 g磷酸氫鈉、0.2 g磷酸二氫鉀、0.2  g 氯化鉀溶解于約 990 mL 水中 , 用濃鹽酸調(diào)節(jié) pH=7.0，用水稀釋至 1 L。

 二、免疫親和柱凈化（Copure? 赭曲霉毒素 A 免疫親 和柱，3 mL） 

上樣：取待凈化樣品 2 mL 過柱，棄掉流出的液體。

淋洗和洗脫：加入 20 mL 水淋洗柱子，分兩次淋洗，棄掉流 出的液體，抽干小柱；加入 2 mL 甲醇緩慢洗脫親和柱，流速 約為 2-3 秒 / 滴。 

重新溶解：40℃下氮吹至近干，加 1 mL 初始流動(dòng)相復(fù)溶，0.22  μm 濾膜過濾，供 HPLC 分析。

 三、儀器條件

設(shè)備：Waters Alliance 2695 色譜柱：Inertsustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測(cè)器：Waters 2475 熒光檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)：激發(fā)波長(zhǎng) : 333 nm  發(fā)射波長(zhǎng) : 447 nm 流動(dòng)相：A：乙腈   B：2% 乙酸水溶液 洗脫方式：等度洗脫，A：B=49.5：50.5 流速：1 mL/min 進(jìn)樣體積：20 μL 

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

表 1 25.0 μg/kg 食品中赭曲霉毒素 A 的添加回收結(jié)果