1、標(biāo)準(zhǔn)品配制

? 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品，用水配制成10 mg/mL的儲(chǔ)備液，吸取一定體積10 mg/mL儲(chǔ)備液用水配成濃度為1000 ug/mL的儲(chǔ)備液。

2、提取

2.1 含蛋白脂肪類液體：液態(tài)奶、酸奶、醬油和醋 10 mL樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取 ? ? ? ? 10 mL上清液，待凈化。

2.2 含蛋白脂肪類固體：餅干、奶酪和奶茶 5 g樣品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸鉛溶液，振蕩2 min，超聲提取5 min，6000 rpm離心5 min，取10 mL上清 ? ? ? 液，待凈化。

2.3 飲料：可樂(lè)（量取前超聲排氣泡） 10 mL樣品，加入10 mL 水，混勻，取10 mL，待凈化。

2.4 果凍 5 g樣品，加入5 mL 水，熱水超聲溶解，混勻，趁熱凈化。

3、凈化 ProElut PLS 200 mg/6 mL（Cat#68012）

(1)活 化： 依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液；

(2)上 樣： 將待凈化液加入柱中，棄去流出液（控制流速不超過(guò)每秒1滴）；

(3)淋 洗： 向柱中加入5 mL20%甲醇水溶液，棄去流出液；

(4)洗 脫： 向柱中加入3 mL甲醇，收集流出液。

(5)定 容： 將洗脫液在50℃下減壓蒸干，用流動(dòng)相定容至1 mL，供HPLC分析。

色譜柱：Diamonsil C18(2) 150×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99601），

流速：1.0 mL/min，

進(jìn)樣量：20 μL，

柱溫：35 ℃，

檢測(cè)器：SEDEX LT-ELSD，

溫度：40℃，

壓力：3.5 bar，Gain：6

流動(dòng)相：A：水；B：乙腈

本方案適用于液態(tài)奶、酸奶、醬油、醋、餅干、奶酪、奶茶、可樂(lè)和果凍中三氯蔗糖的檢測(cè)，方法定量限7.5 mg/kg。（GB 22255-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測(cè)定中提取為75%甲醇水溶液，減壓濃縮過(guò)程中暴沸嚴(yán)重，不易操作。）